發(fā)布時間：2020-10-19 07:59

　　 惡性腫瘤嚴重威脅人類健康,尋找有效治療方法具有重要意義。光動力療法(PDT)具有副作用小、耐藥、全身毒性低等優(yōu)點,在腫瘤治療領域具有廣闊的應用前景。多機制的協同治療可實現更好的抗癌效果,在生物醫(yī)學研究和腫瘤治療的臨床實踐中具有廣闊的前景。本論文分別選用自噬促進藥物及鐵死亡誘導藥物與光敏藥物酞菁(ZnPc)聯合,通過多機制協同作用實現腫瘤高效治療。具體研究內容及研究結果如下:1.“自噬激活”與“光動力療法”協同腫瘤治療研究腫瘤組織血管發(fā)育不全導致其營養(yǎng)物質匱乏,易激活腫瘤細胞內自噬效應。文獻研究表明,在不同條件下,自噬效應在腫瘤治療中可發(fā)揮促進細胞存活或死亡的相反作用。PDT治療過程中產生的活性氧(ROS)可以引發(fā)細胞自噬效應。在PDT過程中,促進細胞自噬或抑制細胞自噬是否會影響PDT活性的問題尚無文獻報道。為明確該問題,本論文首先研究了自噬促進劑(雷帕霉素,Rapa)及自噬抑制劑(氯喹,CQ及6-氨基-3-甲基嘌呤,3-MA)對PDT抗腫瘤活性的影響。研究發(fā)現極低的藥物濃度下(自噬促進劑或自噬抑制劑單獨使用無腫瘤細胞殺傷效果),自噬促進劑Rapa能顯著提高PDT抗腫瘤活性,而自噬抑制劑CQ與3-MA無此效果�；�于此,合成含可被ROS觸發(fā)斷裂的縮硫醛基團的聚酰胺樹突狀分子(RSV),利用其自組裝形成的納米膠束裝載Rapa及ZnPc形成復合納米藥物Rapa@RSV@Pc。經靜脈注射進入荷瘤小鼠體內后,納米膠束將Rapa和ZnPc傳遞至腫瘤部位。選擇性光照腫瘤部位可激發(fā)ZnPc產生ROS,觸發(fā)縮硫醛斷裂破壞膠束,釋放Rapa,實現自噬促進與PDT協同腫瘤治療。細胞實驗表明,“自噬激活”與“光動力療法”聯合治療可獲得理想腫瘤治療效果。與單一 PDT療法(24.8%腫瘤殺傷率)相比,聯合療法顯著提升腫瘤細胞殺傷效率(76.8%腫瘤殺傷率)。體內實驗表明,復合納米藥物Rapa@RSV@Pc可在腫瘤組織有效富集,并顯著提升腫瘤抑制效果(單一 PDT治療腫瘤尺寸減小了20.7%,聯合療法腫瘤尺寸減小了 54.8%)。2.“鐵死亡促進”與“光動力療法”協同腫瘤治療研究鐵死亡是一種新的程序性細胞壞死形式,隨著大量的鐵離子的累積,導致大量活性氧產生及脂質過氧化。PDT腫瘤治療亦基于活性氧產生的生物分子氧化損傷。因此,我們設想鐵死亡與PDT協同作用能強化腫瘤細胞氧化損傷,提升抗腫瘤活性。體內研究表明,極低的藥物濃度下(Erastin單獨使用無腫瘤細胞殺傷效果),Erastin能顯著提高PDT抗腫瘤活性�；�于此,論文使用聚酰胺樹突狀分子自組裝形成的納米膠束共載鐵死亡誘導劑Erastin及光敏劑ZnPc組成復合藥物Era@RSV@Pc,確保兩種藥物體內同步傳輸、同步腫瘤組織富集且同步發(fā)揮活性。體內研究結果表明,復合藥物Era@RSV@Pc經尾靜脈注射進入荷瘤小鼠后,可能通過納米粒子的增強通透性和保留(EPR)效應在腫瘤組織富集。選擇性光照腫瘤組織后,ZnPc產生ROS觸發(fā)PDT過程并誘發(fā)膠束結構中硫縮醛斷裂,釋放Erastin。最終實現“鐵死亡促進”與“光動力療法”協同高效腫瘤治療(體外實驗單一 PDT治療抑制率41.4%,聯合療法抑制率77.3%;體內實驗單一 PDT治療腫瘤尺寸減小了 13.5%,聯合療法腫瘤尺寸減小了 29.2%)。
【學位單位】：南京師范大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：TQ460.1;R73-3
【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 光動力療法
        1.1.1 基本原理
        1.1.2 起源與發(fā)展
        1.1.3 兩種機制
        1.1.4 優(yōu)點與局限性
        1.1.5 臨床應用現狀
    1.2 自噬
        1.2.1 原理與功能
        1.2.2 分類
        1.2.3 分子機制
        1.2.4 細胞自噬的研究方法
    1.3 鐵死亡
        1.3.1 原理
        1.3.2 調控藥物
        1.3.3 鐵死亡通路
        1.3.4 鐵死亡在癌癥治療中的作用
        1.3.5 鐵死亡特征
    1.4 協同治療
        1.4.1 腫瘤單一治療現狀
        1.4.2 多模式協同治療的定義
        1.4.3 協同療法的優(yōu)勢
    1.5 本論文的選題依據、意義及研究內容
        1.5.1 選題依據與意義
        1.5.2 研究內容
第2章 ROS響應載體與甲酸鋅酞菁ZnPc的合成
    2.1 儀器和試劑
        2.1.1 儀器
        2.1.2 試劑
    2.2 ROS響應載體的合成
    2.3 甲酸鋅酞菁(ZnPc)的合成
        2.3.1 4-(3,4-二腈基苯氧基)苯甲酸的合成
        2.3.2 甲酸鋅酞菁(ZnPc)的合成
    2.4 本章小結
第3章 自噬協同的光敏抗腫瘤活性研究
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 儀器、試劑、細胞與動物
        3.2.2 實驗方法
    3.3 結果與討論
        3.3.1 PDT與自噬抑制劑或激活劑的聯合治療效果
        3.3.2 藥物裝載及藥物控釋
        3.3.3 亞細胞定位
        3.3.4 體外安全性與光敏抗腫瘤活性
        3.3.5 細胞內活性氧檢測
        3.3.6 自噬檢測
        3.3.7 凋亡檢測
        3.3.8 體內光敏抗腫瘤活性研究
    3.4 本章小結
第4章 鐵死亡協同的光敏抗腫瘤活性研究
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 儀器、試劑、細胞與動物
        4.2.2 實驗方法
    4.3 結果與討論
        4.3.1 藥物裝載與藥物控釋
        4.3.2 亞細胞定位
        4.3.3 體外安全性和光敏抗腫瘤活性
        4.3.4 細胞內活性氧檢測
        4.3.5 鐵死亡檢測
        4.3.6 凋亡檢測
        4.3.7 體內光敏抗腫瘤活性研究
    4.4 本章小結
第5章 總結與展望
    5.1 總結
    5.2 展望
參考文獻
在讀期間研究成果
致謝

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 牟婕;馮文靜;王珊;馮美蘋;毛擁軍;;自噬調控衰老的研究進展[J];中華老年多器官疾病雜志;2019年01期

2 李黎;季漪;李文婷;馬艷霞;李沐涵;吳勉華;;基于細胞自噬的中醫(yī)藥抗腫瘤作用研究進展[J];中華中醫(yī)藥雜志;2019年01期

3 汪艷;;調控自噬在臨床肝病治療性應用的轉化研究[J];肝臟;2019年07期

4 韓蘇夏;蔡夢嬌;;自噬在腫瘤治療策略中的角色[J];西部醫(yī)學;2018年09期

5 周岐鳴;劉洋;季光;宋海燕;;調節(jié)自噬改善非酒精性脂肪性肝病的藥物研究進展[J];中華中醫(yī)藥學刊;2018年10期

6 李曉瓊;何玲玲;李新毅;;自噬與中樞神經系統退行性疾病研究進展[J];中風與神經疾病雜志;2018年10期

7 馬文科;戴舒惠;羅鵬;楊悅凡;費舟;;線粒體自噬的研究進展[J];現代生物醫(yī)學進展;2017年06期

8 付婉;董笛;趙穎;;自噬的相關分子機制[J];中國生物化學與分子生物學報;2017年05期

9 方聰聰;毛善平;董慧敏;劉寶輝;王舜;;線粒體自噬與中樞神經系統疾病關系的研究進展[J];卒中與神經疾病;2017年02期

10 李旭卉;吳習習;張凱;羅海霞;李敏;;線粒體自噬與癌癥關系的研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2017年09期

相關博士學位論文 前10條

1 閆冬瑩;錳誘導的α-synuclein蛋白寡聚體與自噬的相互作用對神經細胞損傷的分子機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

2 高祥;鑭對大鼠中樞神經系統神經細胞自噬水平的影響及其相關機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

3 劉婷婷;GSK-3β調節(jié)自噬影響DCD供肝缺血再灌注損傷機制的研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

4 史勱;STAT5調控自噬在腎小球系膜細胞衰老過程中的作用及氯沙坦對其的影響[D];中國醫(yī)科大學;2019年

5 郭劍波;LncRNA CCAT1在肝細胞癌中通過海綿吸附miR-181上調ATG7促進自噬的機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

6 馮浩;自噬抵抗細胞上皮—間葉樣表型轉化進程維持視網膜色素上皮穩(wěn)態(tài)[D];中國醫(yī)科大學;2019年

7 張華璐;鋅轉運體Zip7對線粒體自噬的調控作用及分子機制研究[D];天津醫(yī)科大學;2019年

8 張斌;自噬在高碘誘導SH-SY5Y細胞及大鼠海馬組織凋亡中的作用研究[D];天津醫(yī)科大學;2019年

9 李琦;MST1激活JNK/p53通路抑制線粒體自噬調控直腸癌細胞生長的研究[D];天津醫(yī)科大學;2019年

10 李永麗;STAT3、自噬在非酒精性脂肪性肝炎炎癥中的作用及二甲雙胍抗炎機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2019年

相關碩士學位論文 前10條

1 王雨;miR-122通過靶定PKM2調節(jié)自噬影響砷誘導的雞肝損傷[D];東北林業(yè)大學;2019年

2 田凈凈;K-115調控自噬抑制人Tenon’s囊成纖維細胞活化[D];河北北方學院;2019年

3 黃健妮;激素治療FSGS療效探討及自噬和MCP-1水平在COL4A3突變相關腎病中的作用[D];上海交通大學;2018年

4 馮一吉;自噬參與Aβ介導的RPE細胞炎癥的作用及機制研究[D];上海交通大學;2018年

5 謝潔;VDAC1介導的線粒體自噬活化NLRP3炎癥體在糖尿病視網膜病變中的作用機制研究[D];華南理工大學;2019年

6 彭鑫;冬眠達烏爾黃鼠骨骼肌中自噬水平的變化與調控機制的研究[D];西北大學;2019年

7 陳思;miR-101通過靶向Atg4D抑制矽肺大鼠肺泡巨噬細胞自噬的作用研究[D];華北理工大學;2019年

8 楊靜亞;ATG4D對染塵后大鼠肺泡巨噬細胞自噬流的影響[D];華北理工大學;2019年

9 楊越;IP_3R在TOCP調節(jié)的神經細胞自噬中的作用與機制[D];南華大學;2019年

10 羅浩蕩;肺炎支原體膜脂質經TLR4和自噬途徑調控小鼠巨噬細胞分泌促炎細胞因子[D];南華大學;2019年

本文編號：2846938