發(fā)布時間：2017-12-15 00:11

  本文關(guān)鍵詞：苦參露對脂多糖誘導(dǎo)大鼠小腸炎癥的保護(hù)作用及其機(jī)制研究

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【摘要】：中藥苦參是豆科植物Sophora flavescensAit.的干燥根,氣寒味苦,具有清熱燥濕的作用,在中醫(yī)臨床中多用于治療腸炎、痢疾等疾患。藥露,是將藥物進(jìn)行蒸餾獲得的水狀液體,作為一種傳統(tǒng)的中藥劑型,其種類繁多,盛行于清代。本研究以水蒸氣蒸餾法對苦參飲片進(jìn)行蒸餾,制得苦參露(KSL),通過動物模型和細(xì)胞模型探究其藥理學(xué)活性,評估其對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的大鼠小腸炎癥的保護(hù)作用并闡釋其可能的作用機(jī)制。試驗(yàn)方法:動物試驗(yàn):將Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為四組,即Control組、LPS組、LPS+H20組、LPS+KSL組,每組六只。LPS+H20組及LPS+KSL組每日分別接受80mL蒸餾水或等量KSL超聲霧化吸入;Contral組及LPS組則每日被置于霧化箱內(nèi),不進(jìn)行霧化。以上操作均為每日一次,每次30分鐘,連續(xù)五日。之后,Control組接受生理鹽水腹腔注射,剩余組則接受10mg/kg LPS懸濁液腹腔注射。腹腔注射后7h,將大鼠斷頭處死,采集血液及小腸組織樣本。通過腹腔注射后體重變化率、血清炎癥因子水平、血細(xì)胞計(jì)數(shù)及小腸組織炎癥相關(guān)蛋白的表達(dá)情況等指標(biāo)評估苦參露對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠小腸炎癥的保護(hù)作用。細(xì)胞試驗(yàn):以大鼠小腸上皮隱窩細(xì)胞(IEC-6)及大鼠小腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞(RIMVEC)作為模型細(xì)胞,以不同劑量的苦參露和LPS先后作用于細(xì)胞,通過ELISA法和Western Blot法測定其上清中炎癥因子的含量及細(xì)胞中炎癥相關(guān)通路蛋白的表達(dá)情況。試驗(yàn)結(jié)果:(1)10mg/kg劑量脂多糖懸濁液腹腔注射能夠成功制備大鼠小腸炎癥模型;(2)大鼠超聲霧化吸入苦參露可顯著緩解脂多糖引起的以下癥狀:腹瀉,紅細(xì)胞、血紅蛋白、總白細(xì)胞及血小板濃度下降,血清促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)濃度升高,小腸組織中TLR4表達(dá)的增加,IκBα的降解以及p65磷酸化的增加;(3)苦參露預(yù)處理通過減少TLR4、MyD88、TRIF表達(dá),從上游抑制IEC-6、RIMVEC細(xì)胞NF-κB及MAPK信號通路的激活及轉(zhuǎn)導(dǎo);通過降低p65磷酸化水平和減少IκBα降解,直接抑制細(xì)胞NF-κB的激活;通過降低ERK、JNK、p38的磷酸化水平,直接抑制細(xì)胞MAPK信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)。結(jié)論:在試驗(yàn)條件下,苦參露能夠有效緩解脂多糖誘導(dǎo)的大鼠小腸炎癥。其機(jī)制可能是通過抑制小腸上皮細(xì)胞及微血管內(nèi)皮細(xì)胞TLR4、NF-κB及MAPK信號通路的激活從而減少IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌,進(jìn)而減輕LPS誘導(dǎo)的炎癥對小腸組織的損傷作用。
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S853.74

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本文編號：1289893