發(fā)布時(shí)間：2021-03-19 18:18

　　脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）又稱嘔吐毒素（vomitoxin）,是一種毒性較高的次級(jí)代謝產(chǎn)物,主要是由黃色鐮刀菌（Fusarium culmorum）和禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）產(chǎn)生,屬于B族單端孢霉烯族化合物。DON主要污染小麥、玉米及其副產(chǎn)物,因此,廣泛存在于自然界中的食品及動(dòng)物飼料中。它易引起動(dòng)物拒食,而表現(xiàn)出免疫毒性、器官毒性、抑制蛋白質(zhì)合成,以及致畸性,與免疫抑制、克山病、食管癌等疾病也有密切聯(lián)系,并且,DON的熱穩(wěn)定性較強(qiáng),對(duì)其進(jìn)行一般性的加工及烹調(diào),其毒性不能被破壞。因此,DON污染不僅給動(dòng)物健康帶來(lái)了巨大威脅,也影響到了人類(lèi)的身體健康,全球大多數(shù)國(guó)家強(qiáng)制性規(guī)定了DON的限量標(biāo)準(zhǔn),國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)將DON列為Ⅲ類(lèi)致癌物。目前,檢測(cè)食品和飼料中DON污染的理化方法,雖然具有高精度和高靈敏度,但是成本較高,不適合用于DON污染檢測(cè)的一般飼料行業(yè)。而酶聯(lián)免疫檢測(cè)（ELISA）作為傳統(tǒng)方法,不需要特殊的儀器設(shè)備、適合現(xiàn)場(chǎng)并且適用于高通量篩選等特點(diǎn),被認(rèn)為是一種合適的檢測(cè)工具,近年來(lái)其開(kāi)發(fā)應(yīng)用迅速發(fā)展。目的:本研究以DON毒素為研究對(duì)象,為避免理化檢測(cè)的... 

【文章來(lái)源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：109 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

種人工抗原的UV掃描譜圖

石河子大學(xué)博士學(xué)位論文飼料中嘔吐毒素單抗的研制及icELISA試劑盒和GICA試紙條檢測(cè)方法的建立302.1.3IR鑒定結(jié)果見(jiàn)圖1-7。4種方法制備的免疫原DON-BSA（CDI）、DON-BSA（EDC）、DON-BSA（IBCF）、DON-BSA（NHS）與BSA相比較，它們都具有載體蛋白BSA的氨基酸特征峰，它們的IR在2500～3200cm-1和1660～1500cm-1的區(qū)域內(nèi)有相似的吸收，說(shuō)明人工抗原中有BSA的存在；人工抗原與DON的紅外線吸收結(jié)果相比較，在1050～1150cm-1的區(qū)域內(nèi)有相似的吸收，這是DON中醇羥基產(chǎn)生的特征峰，而B(niǎo)SA在此處無(wú)吸收，說(shuō)明人工抗原中含有DON。試驗(yàn)結(jié)果表明，4種免疫原均合成成功。圖1-74種人工抗原的IR掃描譜圖Fig.1-7TheIRidentificationoffourartificialantigen2.1.4SDS-PAGE鑒定結(jié)果見(jiàn)圖1-8。BSA的分子量約為66.4KD，DON的分子量為0.296KD。4種方法制備的免疫原DON-BSA（CDI）、DON-BSA（EDC）、DON-BSA（IBCF）、DON-BSA（NHS）的蛋白條帶與BSA條帶相比較，它們的位置均較靠上，說(shuō)明免疫原的泳動(dòng)較BSA速度慢，也就是人工抗原的分子量高于BSA。由此可以初步證明4種免疫原均合成成功。

石河子大學(xué)博士學(xué)位論文飼料中嘔吐毒素單抗的研制及icELISA試劑盒和GICA試紙條檢測(cè)方法的建立31注：1Maker.2BSA.3DON-BSA(CDI).4DON-BSA(EDC).5Blank.6DON-BSA(IBCF).7DON-BSA(NHS).圖1-84種人工抗原的SDS-PAGE鑒定Fig.1-8TheSDS-PAGEcharacteristicoffourartificialantigen2.2人工抗原的免疫學(xué)特性試驗(yàn)結(jié)果2.2.1效價(jià)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1-1及圖1-9。對(duì)雌性Balb/C小鼠免疫，大小為6周齡，采用4種方法合成的免疫原免疫，每種免疫原免疫1組共4組。經(jīng)5次免疫后，用間接ELISA測(cè)定效價(jià)并進(jìn)行比較，共挑選出4只小鼠，從每組挑選小鼠1只最高效價(jià)的，多抗血清效價(jià)都達(dá)到了1∶（1.6×103）。試驗(yàn)結(jié)果表明，4種免疫原的效價(jià)都符合要求，但按評(píng)價(jià)的免疫效果，由高到低依次為DON-BSA（CDI）、DON-BSA（EDC）、DON-BSA（IBCF）、DON-BSA（NHS）。表1-14只小鼠多抗的效價(jià)測(cè)定Table1-1ThetitersdeterminationofDONpAboffourmice序號(hào)抗血清稀釋倍數(shù)dilutedmultipleofantiserum陰性空白Number2004008001600320064001280025600NegativeBlankEDC1.4730.8170.4270.2380.1470.1020.0920.0790.0640.055NHS1.2850.6780.2690.1320.0850.0790.0750.0680.0620.060CDI2.1821.7241.2790.8090.4460.2560.1640.1350.0890.075IBCF1.9821.5321.0310.6180.3240.1710.1380.1160.0850.072

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]脫氧雪腐鐮刀菌烯醇間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒的研制及初步應(yīng)用[J]. 韓麗,張文舉,王自良,李月濤,姜金慶,李任峰,范國(guó)英,張海棠,牛琳琳,呂俊美,周葉.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2019(11)
[2]T-2毒素快速定量檢測(cè)試紙條的研究[J]. 許會(huì)靜,李玉杰,張馨月,王弘瑞,苗茁,柳玉,李艷,王會(huì)巖,董媛.  食品研究與開(kāi)發(fā). 2019(19)
[3]2018年19省市飼料及飼料原料霉菌毒素污染狀況分析[J]. 黃俊恒,黃廣明.  養(yǎng)豬. 2019(03)
[4]2018年我國(guó)部分地區(qū)飼料及飼用原料霉菌毒素污染調(diào)查報(bào)告[J]. 杜妮.  豬業(yè)科學(xué). 2019(02)
[5]2017年我國(guó)部分地區(qū)飼料及飼用原料霉菌毒素污染調(diào)查報(bào)告[J]. 杜妮.  豬業(yè)科學(xué). 2018(02)
[6]黃曲霉毒素B1半抗原分子設(shè)計(jì)與抗原合成及抗體特性研究進(jìn)展[J]. 王亞楠,王曉斐,牛琳琳,雷壯,張海棠,王自良.  食品工業(yè)科技. 2016(23)
[7]蜂毒的主要成分及藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 張冰清,劉曉波.  藥學(xué)研究. 2016(03)
[8]我國(guó)西南地區(qū)肉禽配合飼料中霉菌毒素的污染分布規(guī)律[J]. 李雅伶,王建萍,李云,丁雪梅,白世平,曾秋鳳,程傳民,高慶軍,柏凡,張克英.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(02)
[9]液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定小麥粉中11種真菌毒素[J]. 李磊,李海暢,周貽兵,林野.  食品研究與開(kāi)發(fā). 2016(03)
[10]ELISA檢測(cè)小麥粉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的優(yōu)化[J]. 侯霄煜.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2015(03)

博士論文
[1]脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）的多代毒性及其聯(lián)合毒性研究[D]. 周鴻媛.江南大學(xué) 2018
[2]食品中真菌毒素抗體制備及其快速檢測(cè)方法研究[D]. 孔德昭.江南大學(xué) 2017
[3]真菌毒素類(lèi)高靈敏高通量快速檢測(cè)方法研究[D]. 張勛.江南大學(xué) 2014
[4]B型單端孢霉烯族毒素誘導(dǎo)拒食和嘔吐的機(jī)理研究[D]. 吳文達(dá).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]DON誘導(dǎo)的小麥TaPDR1基因的克隆和特征分析以及二穗短柄草多倍體中PDR1基因的系統(tǒng)進(jìn)化[D]. 尚毅.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009

碩士論文
[1]同時(shí)檢測(cè)谷物及中藥材中伏馬毒素B1和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫層析方法的研究[D]. 黃馨雨.南昌大學(xué) 2019
[2]黃曲霉毒素廣譜特異性抗體的制備及總量檢測(cè)免疫試紙方法的建立[D]. 王亞楠.河南科技學(xué)院 2017
[3]脫氧雪腐鐮刀菌烯醇膠體金檢測(cè)試紙條的研制[D]. 李奕亭.集美大學(xué) 2016
[4]同時(shí)檢測(cè)多種真菌毒素的生物芯片技術(shù)研究[D]. 王瑩.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]萊克多巴胺膠體金試紙條生產(chǎn)工藝研究[D]. 黃曉明.暨南大學(xué) 2011
[6]農(nóng)產(chǎn)品中嘔吐毒素的酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法的研究[D]. 馬冬月.天津科技大學(xué) 2010
[7]脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）人工抗原的合成及其酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法的建立[D]. 李華.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3090006