WRKY轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控茶樹甲基化EGCG生物合成的機制研究
發(fā)布時間:2024-11-03 09:34
茶樹[Camellia sinensis(L.)O.Kuntze]是一種重要的經(jīng)濟作物,茶葉中含有茶多酚、氨基酸、維生素、生物堿等多種活性成分,可以預防癌癥、心腦血管等疾病。研究認為,茶的有益活性成分主要是兒茶素。隨著研究的不斷深入,甲基化兒茶素相繼被發(fā)現(xiàn),這種兒茶素被認為比EGCG具有更強的抗過敏和抗高血壓功效,且比EGCG更容易被吸收,目前研究較多的主要是Epigallocatechin-3-O-(3-O-methyl)gallate(EGCG3"Me)。之前,本課題組已從多種茶樹資源中鑒定出高EGCG3"Me含量的金牡丹和金觀音等茶樹品種,但關(guān)于這些品種高EGCG3"Me的分子調(diào)控機制尚不清楚,制約了對這些特異性種質(zhì)資源的認識。因此,本文在前人已有的研究基礎上,探討EGCG3"Me生物合成的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制,以期為高EGCG3"Me茶樹品種選育提供理論依據(jù),進一步推動特異性茶樹種質(zhì)資源的開發(fā)和利用。兒茶素和EGCG3"Me被認為是通過類黃酮生物合成途徑合成的,是一個復雜而高度有序的生物學過程。其合成通路上相關(guān)基因的表達,如CsLAR、CsDFR、CsANS、CsANR和CCoAOMT等...
【文章頁數(shù)】:144 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
本文編號:4011056
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研究表明,VQ蛋白可與WRKY轉(zhuǎn)錄因子互作協(xié)同參與調(diào)控下游基因的表達。為探討第四章與第五章中獲得的3個參與甲基化EGCG生物合成的WRKY轉(zhuǎn)錄因子是否能與VQ蛋白互作,從茶樹轉(zhuǎn)錄組中克隆了7個VQ基因,并獲得了其全長序列,經(jīng)NCBI比對后發(fā)現(xiàn)它們與擬南芥等植物的的VQ4、VQ8、....
圖6-1CsVQs全長擴增電泳圖2.2CsVQs的轉(zhuǎn)錄活性分析
為驗證7個CsVQs是否與CsWRKYs互作,首先分析了7個VQ蛋白在酵母體內(nèi)的自激活活性,將7個VQ基因的全長序列克隆到pGBKT7載體上,將構(gòu)建好的pGBKT7-CsVQs、正對照p53+T-antigen和負對照negativecontrol(pGBKT7-Empty)分....
研究顯示,VQ蛋白是一種重要的輔助轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,最主要的互作對象是WRKY轉(zhuǎn)錄因子。為了驗證茶樹基因組的VQ蛋白是否能與CsWRKY31、CsWRKY48和CsWRKY57like蛋白互作,共同參與甲基化EGCG生物合成的調(diào)控,進行了酵母雙雜交實驗。鑒于CsWRKY31和CsWR....
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