發(fā)布時(shí)間：2018-01-09 12:13

  本文關(guān)鍵詞：單瓣牛心包補(bǔ)片重建右室流出道的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究　出處：《首都醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：第一部分單瓣牛心包補(bǔ)片血液相容性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究目的通過(guò)比較改性符合交聯(lián)處理過(guò)的單瓣牛心包(VBP)與單瓣自體心包(VAP)在體內(nèi)、體外血液相容性各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果,說(shuō)明VBP是否具有良好的血液相容性;通過(guò)觀察動(dòng)物模型是否能夠存活及是否存在嚴(yán)重并發(fā)癥,說(shuō)明使用VBP進(jìn)行手術(shù)操作的可行性。方法(1)建立動(dòng)物模型,15只雄性小尾寒羊,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組(VBP組,n=9)和對(duì)照組(VAP組,n=6),在全麻體外循環(huán)下將一個(gè)肺動(dòng)脈瓣環(huán)連同部分肺動(dòng)脈壁和右室流出道心肌剪除,實(shí)驗(yàn)組用VBP重建,對(duì)照組用術(shù)中縫制瓣兜的VAP重建;(2)體內(nèi)血液相容性檢測(cè),檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模前后靜脈血中的f Hb、血常規(guī)各項(xiàng)(包括RBC、HGB、PLT、WBC、NEUT、NEUT%)指標(biāo),并進(jìn)行比較;(3)體外血液相容性檢測(cè),將15只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的靜脈血液在體外分別與實(shí)驗(yàn)組(VBP組,n=15)和對(duì)照組(VAP組,n=15)接觸后進(jìn)行溶血試驗(yàn)、補(bǔ)體激活試驗(yàn)(C3a、C5a、TCC、Bb、C4d)、血漿可溶性P-選擇素試驗(yàn)以及體外動(dòng)態(tài)凝血試驗(yàn),并進(jìn)行比較。結(jié)果(1)入組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全部存活,未出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥;(2)體內(nèi)血液相容性檢測(cè)中,紅細(xì)胞損傷評(píng)價(jià)結(jié)果為VBP組與VAP組中f Hb含量在術(shù)前、術(shù)后1天、術(shù)后3天、術(shù)后7天對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)上無(wú)顯著差異(p0.05),術(shù)后1天f Hb含量較術(shù)前明顯增加(p0.05);血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果為VBP組與VAP組RBC、HGB、PLT、WBC、NEUT、NEUT%各指標(biāo)在對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)比較均無(wú)差異顯著性(p0.05),VBP組與VAP組中RBC及HGB在術(shù)后較術(shù)前降低,第3天降至最低(p0.001);WBC,NEUT及NEUT%在術(shù)后第3天升高(p0.05);PLT術(shù)后第1-3天較術(shù)前下降(p0.05);(3)體外血液相容性檢測(cè)中,溶血實(shí)驗(yàn)結(jié)果為VBP組溶血率(1.28±0.14%)與VAP組溶血率(1.26±0.06)均小于5%,兩者相比較差異無(wú)顯著性(p0.05);VBP組與VAP組在補(bǔ)體激活實(shí)驗(yàn)中測(cè)定C3a、C5a、Tcc、C4b、Bb各項(xiàng)指標(biāo)含量相比較差異無(wú)顯著性(p0.05);VBP組與VAP組在血漿可溶性P-選擇素測(cè)定含量相比較差異無(wú)顯著性(p0.05);VBP組與VAP組在體外動(dòng)態(tài)凝血試驗(yàn)中在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上所測(cè)得的OD值差異無(wú)顯著性(p0.05)。結(jié)論VBP與VAP接近,具有良好的血液相容性;VBP具有手術(shù)操作的可行性。第二部分單瓣牛心包補(bǔ)片的組織相容性及抗鈣化性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究目的通過(guò)比較改性符合交聯(lián)處理過(guò)的單瓣牛心包(VBP)與單瓣自體心包(VAP)在手術(shù)造模過(guò)程中的操作證實(shí)VBP是否具有手術(shù)操作可行性;通過(guò)心臟彩超測(cè)量動(dòng)物模型的肺動(dòng)脈瓣返流面積及跨瓣壓差證實(shí)VBP的瓣膜功能;通過(guò)標(biāo)本的病理觀察證實(shí)VBP的組織器官相容性;通過(guò)鈣含量測(cè)定證實(shí)VBP是否具有較好的抗鈣化性能。方法(1)建立動(dòng)物模型,15只雄性小尾寒羊,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組(VBP組,n=9)和對(duì)照組(VAP組,n=6),在全麻體外循環(huán)下將一個(gè)肺動(dòng)脈瓣環(huán)連同部分肺動(dòng)脈壁和右室流出道心肌剪除,實(shí)驗(yàn)組用VBP重建,對(duì)照組用術(shù)中縫制瓣兜的VAP重建,并記錄手術(shù)時(shí)間、體外循環(huán)時(shí)間、主動(dòng)脈阻斷時(shí)間;(2)VBP組與VAP組動(dòng)物模型在術(shù)中、術(shù)后1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月分別行心臟彩超檢查,測(cè)量計(jì)算肺動(dòng)脈瓣返流面積及跨肺動(dòng)脈瓣壓差,并進(jìn)行比較;(3)動(dòng)物模型飼養(yǎng)至術(shù)后6個(gè)月,取出VBP和VAP以及相關(guān)臟器(包括心、肝、脾、肺、腎、腦)進(jìn)行病理學(xué)觀察(包括肉眼、光鏡、掃描電鏡);(4)對(duì)移植后VBP和VAP的鈣含量進(jìn)行測(cè)定,并進(jìn)行比較。結(jié)果(1)入組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全部存活,術(shù)后未出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥,本次動(dòng)物造模手術(shù)過(guò)程中,整體手術(shù)時(shí)間VBP組(126±13.2min)較VAP組(151±15.6min)用時(shí)少(p0.05);體外循環(huán)時(shí)間VBP組(73±8.6min)較VAP組(98±11.5min)用時(shí)少(p0.05);主動(dòng)脈阻斷時(shí)間VBP組(33±6.8min)較VAP組(58±7.4min)用時(shí)少(p0.05);(2)心臟彩超測(cè)量肺動(dòng)脈瓣返流面積的結(jié)果為,術(shù)中與術(shù)后1個(gè)月時(shí)VBP組與VAP組相比較差異無(wú)顯著性(p0.05),術(shù)后3個(gè)月與術(shù)后6個(gè)月時(shí)VBP組較VAP組返流面積更小(p0.05),VBP組術(shù)后6個(gè)月(1.87±0.32cm2)與手術(shù)當(dāng)日(1.76±0.53cm2)相比較,差異無(wú)顯著性(p0.05);VAP組術(shù)后6個(gè)月(2.54±0.35cm2)與手術(shù)當(dāng)日(1.81±0.48cm2)相比較,返流加重(p0.05);(3)心臟彩超測(cè)量計(jì)算跨肺動(dòng)脈瓣壓差結(jié)果為,術(shù)中、術(shù)后1個(gè)月、術(shù)后3個(gè)月、術(shù)后6個(gè)月時(shí)VBP組與VAP組相比較差異無(wú)顯著性(p0.05);(4)動(dòng)物模型術(shù)后飼養(yǎng)6個(gè)月取出標(biāo)本進(jìn)行病理觀察,肉眼可見(jiàn)VBP與VAP補(bǔ)片瓣兜質(zhì)地柔軟,開(kāi)閉功能正常,瓣兜未見(jiàn)血栓,內(nèi)壁顏色與自體肺動(dòng)脈內(nèi)壁顏色接近或一致,移行處平整光滑,吻合處未見(jiàn)增生、壞死等改變,其他臟器無(wú)病理改變;HE染色光鏡下觀察可見(jiàn)VBP與VAP致密纖維結(jié)締組織,局部纖維母細(xì)胞增生,灶狀淋巴、漿細(xì)胞浸潤(rùn),局灶可見(jiàn)手術(shù)縫線,未見(jiàn)血栓,內(nèi)壁均可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞附著,其他臟器未見(jiàn)病理改變;掃描電鏡可見(jiàn)術(shù)前VBP內(nèi)壁纖維結(jié)構(gòu)排列整齊致密,期間附著細(xì)胞較少,術(shù)后VBP可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞附著,纖維結(jié)構(gòu)仍然排列緊致,未見(jiàn)疏松、斷裂等情況;(5)流出道補(bǔ)片鈣含量測(cè)定結(jié)果為,VBP組(1834±53μg/g)與VAP組(1795±61μg/g)相比較差異無(wú)顯著性(p0.05)。結(jié)論手術(shù)過(guò)程中,單瓣牛心包操作相對(duì)簡(jiǎn)單,手術(shù)耗時(shí)少,優(yōu)于自體心包,手術(shù)具有可行性;VBP具有較好的抗返流功能;VBP具有較好的組織器官相容性;VBP具有良好的抗鈣化性能。
[Abstract]:The first part of the bovine pericardium patch single objective to study the blood compatibility of animal experiments by comparing with modified cross-linking treated single bovine pericardium (VBP) and single autologous pericardium (VAP) in vivo and in vitro blood compatibility test results of the indicators, show whether VBP has good blood compatibility; through the observation of animal model can survive or not and whether there are serious complications, illustrate the feasibility of using VBP operation. Methods (1) to establish the animal model, 15 male sheep, were randomly divided into experimental group (group VBP, n=9) and control group (group VAP, n=6), general anesthesia and extracorporeal circulation in a lung the aortic valve ring and the part of pulmonary artery and right ventricular outflow tract myocardium cut off, the experimental group with VBP reconstruction, VAP reconstruction group with control of sewing cucullate; (2) the blood compatibility testing, detection of experimental group and control group before and after experimental animal model 闈?rùn)鑴夎。?

本文編號(hào)：1401347