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  本文關(guān)鍵詞：協(xié)同刺激分子B7-H1和B7-H3在食管癌中表達(dá)的臨床意義及作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《蘇州大學(xué)》 2015年

協(xié)同刺激分子B7-H1和B7-H3在食管癌中表達(dá)的臨床意義及作用研究

陳陸俊  

【摘要】：近年來,對腫瘤微環(huán)境和腫瘤免疫逃逸機(jī)制的深入研究發(fā)現(xiàn),一組介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)的重要分子—免疫卡控點(diǎn)(Immune checkpoints),如B7家族負(fù)性協(xié)同刺激分子:B7-H1、B7-H3、B7-H4、CTLA-4和Tim-3等,可異常表達(dá)于諸多人類腫瘤組織及腫瘤浸潤的免疫細(xì)胞,參與腫瘤免疫逃逸并與患者的臨床病理參數(shù)及預(yù)后密切相關(guān),是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分。它們一方面通過負(fù)性調(diào)控T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤應(yīng)答,另一方面通過調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞自身的生物學(xué)行為,共同參與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。截至目前,協(xié)同刺激分子B7-H1、B7-H3分子在食管癌中的異常表達(dá)的臨床意義及生物學(xué)作用尚待深入研究。本課題一方面通過收集臨床樣本進(jìn)行回顧性研究,采用免疫組織化學(xué)及流式細(xì)胞術(shù)分別檢測協(xié)同刺激分子B7-H1和B7-H3在人食管癌細(xì)胞系及食管癌組織中的的表達(dá)水平,同時(shí)分析它們與患者的臨床參數(shù)、預(yù)后、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)及T淋巴細(xì)胞浸潤程度等的相關(guān)性;另一方面在細(xì)胞及分子生物學(xué)水平,進(jìn)一步研究食管癌細(xì)胞株中異常表達(dá)B7-H3分子對其自身細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。本研究結(jié)果顯示:(1)協(xié)同刺激分子B7-H1在食管癌細(xì)胞株及食管癌組織中呈高表達(dá),而在癌旁正常組織中呈低表達(dá);食管癌組織中協(xié)同刺激分子B7-H1主要表達(dá)在食管癌細(xì)胞的胞漿及胞膜。(2)協(xié)同刺激分子B7-H1在食管癌組織中的表達(dá)水平與腫瘤浸潤深度成顯著正相關(guān)(P=0.0261);食管癌組織中B7-H1高表達(dá)的患者,其預(yù)后顯著差于B7-H1低表達(dá)的患者(HR=2.157,95%CI:1.017-4.577,P=0.0452)。(3)協(xié)同刺激分子B7-H1亦可部分表達(dá)于食管癌細(xì)胞的細(xì)胞核,其在食管癌細(xì)胞核內(nèi)的表達(dá)水平與腫瘤浸潤深度成顯著正相關(guān)(P=0.0331),B7-H1在食管癌細(xì)胞核內(nèi)的表達(dá)水平與患者預(yù)后無顯著相關(guān)性(P=0.6755)。(4)我們通過E-cadherin及Vimentin表達(dá)水平的組合,來鑒定食管癌組織中EMT的發(fā)生情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn),食管癌組織中存在EMT的現(xiàn)象,并且T(3+4)組的患者,其EMT發(fā)生的比率顯著高于T(1+2)組的患者(P=0.0097);遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組(M1)組的患者,其EMT發(fā)生的比率顯著高于未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組(M0)的患者(P=0.0253);生存分析結(jié)果顯示,EMT組患者的預(yù)后顯著差于未發(fā)生EMT組的患者(HR=2.470,95%CI:1.971-2.970,P=0.0278);我們將性別、年齡、腫瘤大小、TNM分期、EMT狀態(tài)納入COX模型進(jìn)行多因素分析,結(jié)果顯示EMT狀態(tài)可以作為獨(dú)立的預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)因素(HR=2.306,95%CI:1.103-4.824,P=0.026)。(5)我們發(fā)現(xiàn)EMT組中B7-H1高表達(dá)的比率顯著高于未發(fā)生EMT組患者(P=0.0314),B7-H1高表達(dá)及EMT組的患者,其預(yù)后顯著差于B7-H1低表達(dá)及未發(fā)生EMT的患者(HR=2.876,95%CI:1.182-6.997,P=0.0199)。(6)協(xié)同刺激分子B7-H3在食管癌細(xì)胞株及食管癌組織中呈高表達(dá),而在癌旁正常組織中呈低表達(dá),B7-H3在食管癌細(xì)胞中的表達(dá)主要定位于胞漿胞膜。(7)食管癌組織中B7-H3的表達(dá)水平與腫瘤浸潤深度呈顯著正相關(guān)(P=0.0200),與CD3+T淋巴細(xì)胞浸潤程度呈顯著負(fù)相關(guān)(P=0.0250),食管癌組織中B7-H3高表達(dá)的患者,其預(yù)后顯著差于低表達(dá)的患者(HR=1.564,95%CI:1.040-2.351,P=0.0318);(8)我們采用慢病毒轉(zhuǎn)染及RNAi技術(shù),構(gòu)建了食管癌細(xì)胞株Eca-109中B7-H3下調(diào)表達(dá)的模型,并分別在m RNA及蛋白水平進(jìn)行驗(yàn)證;(9)我們進(jìn)一步通過克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞增殖檢測、劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell侵襲實(shí)驗(yàn),證實(shí)B7-H3在食管癌細(xì)胞系Eca-109中的下調(diào)表達(dá),顯著抑制細(xì)胞克隆形成能力、細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力。綜上所述,我們首次報(bào)導(dǎo)了負(fù)性協(xié)同刺激分子B7-H1、B7-H3在食管癌中表達(dá)的臨床意義及其生物學(xué)作用,證實(shí)它們通過負(fù)性調(diào)控T淋巴細(xì)胞在腫瘤組織中的浸潤及促進(jìn)腫瘤細(xì)胞自身的增殖、遷移及侵襲等能力,參與促進(jìn)食管癌的發(fā)生與發(fā)展。負(fù)性協(xié)同刺激分子B7-H1、B7-H3可作為食管癌診斷和預(yù)后判斷的重要生物學(xué)指標(biāo)。本研究不僅為食管癌發(fā)生發(fā)展過程中腫瘤免疫應(yīng)答機(jī)制的研究提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),而且為食管癌的診斷及免疫治療提供了潛在的靶點(diǎn),具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.1
【目錄】：

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7 楊金;環(huán)氧化酶2在食管癌中的表達(dá)及環(huán)氧化酶2抑制劑對食管癌小鼠移植瘤生長的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 趙迪;食管癌患者血清腫瘤標(biāo)志物的監(jiān)測及臨床意義[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

9 袁果;姓氏與食管癌關(guān)系及其遺傳分子機(jī)理[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

10 張偉;食管癌不同手術(shù)方式對患者術(shù)后體液及細(xì)胞免疫功能的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：協(xié)同刺激分子B7-H1和B7-H3在食管癌中表達(dá)的臨床意義及作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：181657