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  本文關鍵詞：鴉膽子油乳及其聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細胞體內外生長抑制作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《東北林業(yè)大學》 2015年

鴉膽子油乳及其聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細胞體內外生長抑制作用的研究

趙楠  

【摘要】：卵巢癌是婦科常見惡性腫瘤,嚴重威脅著女性健康及生命。中藥鴉膽子油乳注射液具有細胞周期非特異性抗腫瘤作用,同時可以改善細胞免疫狀態(tài),毒副作用小,是臨床上廣泛應用的抗腫瘤中藥。本課題選用鴉膽子油乳注射液為研究對象,采用四氮唑鹽(MTT)法檢測不同濃度鴉膽子油乳以及臨床常用抗腫瘤藥物順鉑與鴉膽子油乳聯(lián)合應用對人卵巢癌SKOV3細胞的生長抑制作用；通過透射電鏡對凋亡細胞進行形態(tài)學觀察；流式細胞儀檢測細胞凋亡率;RT-PCR、Western blot法對鴉膽子油乳、順鉑及其兩者聯(lián)合誘導人卵巢癌SKOV3細胞凋亡過程中NF-κB/p65因子、Caspase-3及其下游凋亡相關因子Be1-2、Bax的表達進行了分析；此外,建立了人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤模型,并對其進行腹腔給藥,觀察鴉膽子油乳、順鉑及其兩者聯(lián)合對人卵巢癌SKOV3腫瘤的生長抑制作用。同時對裸鼠的白細胞及血小板、肝腎功能(ALT、LDH、CR)進行了檢測；采用電鏡觀察了腫瘤組織的病理學形態(tài),并采用Western雜交分析了各組裸鼠整合素α-5及MRP-1/CD9的差異表達。主要研究結果如下：1、鴉膽子油乳對卵巢癌SKOV3細胞生殖抑制作用隨鴉膽子油乳藥物濃度的提高和作用時間的延長而增強,成劑量-時間正效應關系。透射電鏡觀察SKOV3細胞超微結構變化,發(fā)現(xiàn)低、中濃度(25μg/mL、50μg/mL)的鴉膽子油乳可以引起細胞凋亡的早期改變,高濃度的(100μg/mL)可以引起細胞壞死。2、相同作用時間下,鴉膽子油乳及順鉑兩者聯(lián)合對SK0V3細胞的抑制作用顯著高于兩者單獨應用。隨著藥物作用時間延長,各藥物組對人卵巢癌SK0V3細胞抑制率呈上升趨勢。鴉膽子油乳與順鉑聯(lián)合誘導人卵巢癌SK0V3細胞的凋亡作用顯著高于兩者單獨作用,隨著作用時間的延長,各藥物組處理下的SK0V3細胞凋亡率逐漸增強。3、鴉膽子油乳、順鉑及兩者聯(lián)合在誘導人卵巢癌SK0V3細胞凋亡時,下調了NF-κB/p65因子、凋亡抑制基因Bcl-2的表達水平,上調了Caspase-3.促進凋亡基因Bax的表達水平。4、成功建立了人卵巢癌SKOV3裸鼠原位移植瘤模型,并對其進行腹腔給藥。結果表明鴉膽子油乳、順鉑及其兩者聯(lián)合均對人卵巢癌SKOV3裸鼠原位移植瘤的生長具有抑制作用,各組(每組8只)的抑瘤率分別為23.56±3.67%、42.57±3.45%、48.36±3.08%。相對于順鉑,鴉膽子油乳對人卵巢癌SKOV3細胞裸鼠白細胞及血小板、肝腎功能(ALT、LDH、CR)影響較小,呈低毒性。5、應用電鏡,觀察了腫瘤組織的病理學形態(tài),并采用Western blot分析了各組裸鼠整合素α-5及MRP-1/CD9的差異表達。組織切片可見,隨著各處理對腫瘤細胞抑制作用的增強,各組腫瘤細胞由片狀變性趨近于片狀壞死,并可見凋亡小體。Western blot顯示各組裸鼠整合素a-5及MRP-1/CD9存在差異表達。與對照組比較,鴉膽子油乳組及順鉑組整合素、MRP1/CD9均呈現(xiàn)高表達,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。本研究首次提出鴉膽子油乳注射液聯(lián)合順鉑腹腔給藥治療卵巢癌,分別從體外、體內實驗對鴉膽子油乳注射液、順鉑及其兩者聯(lián)合腹腔給藥對人卵巢癌SKOV3細胞及裸鼠移植瘤組織的生長抑制作用進行了研究,為其進一步臨床應用提供了理論依據,為卵巢癌的治療提供新方法、新思路。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：東北林業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【目錄】：

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