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β—半乳糖苷酶EA、ED融合蛋白的表達(dá)及初步功能研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-10 09:42
  酶免疫分析技術(shù)自1971年創(chuàng)立以來,已廣泛用于生物標(biāo)記物的檢測(cè)。酶免疫分析技術(shù)的質(zhì)量依賴于抗原的純度、抗體的特異性、合適標(biāo)記酶的選用,其靈敏度取決于標(biāo)記酶的高度純化和高轉(zhuǎn)化率。利用基因工程生產(chǎn)診斷用酶,使酶的純度大大提高,產(chǎn)量及質(zhì)量均較自然來源酶好,簡(jiǎn)化了制備程序,大大促進(jìn)了酶免疫分析技術(shù)的發(fā)展。 大腸桿菌的β-半乳糖苷酶,因人血漿中缺乏此酶,并具有大量易得的底物,被用于均相及非均相免疫分析,是目前最常用的標(biāo)記酶之一。Henderson等人在1986年利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)大腸桿菌β-半乳糖苷酶酶受體(EA)和酶供體(ED),并利用其α-互補(bǔ)功能創(chuàng)立了克隆酶供體免疫分析(CEDIA)技術(shù)。β-半乳糖苷酶的EA、ED這種α-互補(bǔ)性還被用于分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)相互作用的監(jiān)控、表達(dá)免疫分析等方面的研究。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?利用pGEX-4T-2融合蛋白表達(dá)系統(tǒng)制備重組β-半乳糖苷酶EA/ED蛋白,并對(duì)其活性進(jìn)行研究,為進(jìn)一步研究CEDIA開發(fā)新的試劑盒和利用β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)特性進(jìn)行表達(dá)免疫分 析等打下基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)方法 ... 

【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
一、 摘要
    中文摘要
    英文摘要
二、 正文
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
三、 綜述 免疫分析新技術(shù)的研究進(jìn)展
四、 致謝



本文編號(hào):2908480

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