發(fā)布時間：2020-12-11 11:07

　　胰島素樣生長因子-I（IGF-I）是一種多功能的細胞增殖調(diào)控因子。重組人胰島素樣生長因子-I（rhIGF-I）是一種很有發(fā)展?jié)摿εc廣闊臨床應用前景的藥物，現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展為重組hIGF-I的大規(guī)模生產(chǎn)提供了可能途徑。 基因工程菌的發(fā)酵技術(shù)是基因工程藥物大規(guī)模生產(chǎn)的必備技術(shù)。本研究構(gòu)建了重組hIGF-I工程菌E.coli BL21（DE3）/pRSET-IGF，對該重組工程菌的生長及產(chǎn)物的表達規(guī)律進行了探索，并在此基礎上進行高密度發(fā)酵的初步研究，菌體最終發(fā)酵密度達OD₆₀₀值20，表達的重組蛋白占菌體總蛋白的25.4％，初步形成了一套重組hIGF-I工程菌發(fā)酵的工藝。 重組hIGF-I在重組工程菌E.coli BL21（DE3）/pRSET-IGF中以包涵體的形式表達。針對這一重組蛋白包涵體的洗滌、變性、復性以及最終的分離純化過程進行研究。實驗結(jié)果表明，洗滌的包涵體純度可達67.8％；8mol/L尿素及10mmol/L DTT可以使包涵體充分溶解。在復性過程中，采用分步透析逐漸降低尿素濃度的方法，可以有效地提高復性的效率；與此同時，在復性液中加入氧化型... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略語
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 重組hIGF-1工程菌的發(fā)酵研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 重組人胰島素樣生長因子-Ⅰ的純化研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻
綜述 重組人胰島素樣生長因子-Ⅰ研究進展
致謝
在校期間發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2910424