發(fā)布時(shí)間：2019-07-08 19:52

【摘要】：自2015年3月份以來(lái),山東、江蘇、安徽、河南等地區(qū)的商品肉鴨中發(fā)生了以雛鴨的生長(zhǎng)發(fā)育緩慢,上下鴨喙萎縮,舌頭腫脹,僵硬及向外伸出彎曲綜合病癥,該病的致死率較低,發(fā)病率可達(dá)15%-45%,采食量嚴(yán)重下降,感染后期在抓捕時(shí)腿部及翅膀的骨骼容易造成骨折,給養(yǎng)殖戶(hù)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失,該病被命名為“鴨大舌-短喙綜合征”。2015年12月,山東菏澤、肥城地區(qū)某養(yǎng)殖規(guī)模各大約為6500只鴨場(chǎng)鴨群中出現(xiàn)類(lèi)似鴨大舌-短喙綜合征癥狀,我們對(duì)送檢病例進(jìn)行了研究。本研究通過(guò)自然發(fā)病鴨的流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、病理組織學(xué)檢查、細(xì)菌培養(yǎng)、血涂片觀察、血清生化指標(biāo)檢測(cè)、PCR檢測(cè)、病毒分離增殖、病毒純化、電鏡負(fù)染、透射超薄切片觀察、高通量測(cè)序和人工致病試驗(yàn)等方面進(jìn)行研究。通過(guò)送檢自然感染鴨的剖檢觀察肝臟邊緣有灶狀壞死,肺臟充血、腫脹鴨舌向外伸出,僵硬。血涂片觀察發(fā)現(xiàn)血液中出現(xiàn)大量異嗜性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞;病理組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)鴨舌、喙、肝臟以出現(xiàn)以淋巴細(xì)胞為主的炎性浸潤(rùn),肝臟、心肌及胰腺發(fā)生壞死,肺臟和腎臟出血,其他組織出現(xiàn)不同病理變化;通過(guò)PCR檢測(cè)鴨病毒性肝炎病毒、鴨坦布蘇病毒、鴨呼腸孤病毒均呈陰性,鵝細(xì)小病毒(GPV)和鴨圓環(huán)病毒(DuCV)均呈雙陽(yáng)性;血清生化指標(biāo)檢測(cè)分析谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、總膽紅素、直接膽紅素、總蛋白等生化指標(biāo)于健康鴨比較差異顯著或差異極顯著;細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果為陰性;通過(guò)PCR方法對(duì)GPV和DuCV的自然感染鴨的流行調(diào)查分析,發(fā)現(xiàn)自然感染鴨中GPV和DuCV的共感染比例高達(dá)40%。通過(guò)對(duì)病料的無(wú)菌分離,取病鴨的肝、舌組織,經(jīng)尿囊腔按0.2ml接種量接種9d鴨胚后,15d收集鴨胚尿囊液。通過(guò)鴨胚胚胎的剖檢觀察到感染組鴨胚胚胎的胸肌、皮下及心臟彌漫性出血,肝臟壞死,對(duì)照組正常;病理組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)感染組的心肌細(xì)胞出現(xiàn)局部性或彌漫性出血,心肌細(xì)胞輕微空泡變性,肝臟的中央靜脈周?chē)�出現(xiàn)彌漫性嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn);正常對(duì)照組的肝臟和心臟未出現(xiàn)病變。通過(guò)PCR檢測(cè)鴨胚尿囊液GPV和DuCV均呈雙陽(yáng)性。通過(guò)對(duì)鴨胚尿囊液中病毒經(jīng)蔗糖梯度超速離心,純化病毒。純化后病毒經(jīng)電鏡負(fù)染觀察到有的病毒粒子呈直徑為20-22nm或14-20.5nm,六角形、球形或二十面體,無(wú)囊膜的完整病毒粒子。將純化后病毒提取DNA,經(jīng)全基因擴(kuò)增,通過(guò)高通量測(cè)序證實(shí)病毒粒子為DuCV。通過(guò)核苷酸序列分析結(jié)果表明,該GPV毒株與與中國(guó)GPV型QH15毒株的親緣關(guān)系最近,其同源性為99.8%,與其他毒株的同源性大部分在93.5%~99.8%。利用高通量測(cè)序手段獲得DuCV的全基因,并命名為SDFC12毒株(GenBank:KY328304.1),DuCV的毒株的SDFC12株與中國(guó)DU103株的親緣關(guān)系最近,其同源性為99.3%,與其他毒株的同源性在29.2%~99.3%。對(duì)感染鴨胚胚胎的肝臟透射電鏡觀察結(jié)果顯示,肝臟內(nèi)有大量的六角形或球形,直徑為14-22nm的無(wú)囊膜完整病毒粒子存在。通過(guò)人工接種回歸動(dòng)物試驗(yàn),剖檢觀察感染組的鴨舌略長(zhǎng)且彎曲,肝臟壞死,胸腺出血,脾臟、法氏囊及胸腺比對(duì)照組重量減輕,免疫器官指數(shù)明顯下降。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的病理組織學(xué)觀察及血涂片觀察與臨床自然感染鴨基本一致。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血清生化指標(biāo)檢測(cè)分析試驗(yàn)組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、堿性磷酸酶、總膽紅素總蛋白等生化指標(biāo)與對(duì)照組相比差異顯著或差異極顯著。通過(guò)PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的GPV和DuCV均呈雙陽(yáng)性。通過(guò)本研究結(jié)果表明,鴨大舌-短喙綜合征與GPV和DuCV共感染相關(guān),經(jīng)電鏡負(fù)染觀察到鵝細(xì)小病毒和鴨圓環(huán)病毒的病毒形態(tài)。經(jīng)病理組織學(xué)檢測(cè)、血清生化指標(biāo)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)鴨大舌-短喙綜合征引起鴨的肝臟的膽管上皮腫脹、硬化性膽管炎、肝硬化及肝壞死,引起鴨的胰腺炎。經(jīng)高通量測(cè)序,驗(yàn)證鴨圓環(huán)病毒的存在,并獲得其全基因序列。通過(guò)本研究,有助于鴨大舌-短喙綜合征的致病機(jī)制研究,有助于防治鴨大舌-短喙綜合征,有助于養(yǎng)鴨行業(yè)的健康發(fā)展。
文內(nèi)圖片：
圖片說(shuō)明：病鴨的剖檢病變Fig.1NecropsylesionsoftheducksA、D：病鴨的鴨舌舌頭向外伸出、僵硬、腫脹；B：肝臟邊緣有灶狀壞死；C：肺臟充血、腫脹A.D:Thetongueofthesickduckisstretchedout,stiffandswollen;B.Liveredgefocalnecrosis;C:Lungcongestion,
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：S858.32

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8 本報(bào)記者 李艷;政策解讀惠農(nóng)民科學(xué)技術(shù)促生產(chǎn)[N];福建日?qǐng)?bào);2011年

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本文編號(hào)：2511833