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荷包豬SLA-2/肽四聚體構(gòu)建與功能檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2020-12-04 14:21
  主要組織相容性復(fù)合物(major histocompatibility complex,MHC)是一種存在于脊椎動(dòng)物中的由一個(gè)龐大的基因家族編碼的細(xì)胞表面分子,其產(chǎn)物是參與抗原提呈和T細(xì)胞激活的關(guān)鍵分子。不同種屬動(dòng)物的MHC及其編碼的抗原系列有不同的命名,豬的MHC分子又叫做豬白細(xì)胞抗原(SLA)。MHC-I四聚體可以對(duì)抗原特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)進(jìn)行檢測(cè)和篩選,已作為研究機(jī)體細(xì)胞免疫功能、評(píng)價(jià)特異性免疫治療和探究疾病機(jī)理的重要工具。本研究中,首先亞克隆六個(gè)品系SLA-2-BSP(重鏈)胞外區(qū)以及一類sβ2m(輕鏈)成熟肽基因。包括三個(gè)國(guó)外品系長(zhǎng)白豬(YC)、大約克豬(DCY)、托佩克豬(TPK),三個(gè)國(guó)內(nèi)地方品系荷包豬(HB)、萊蕪黑豬(LWH)和煙臺(tái)黑豬(YTH)。隨后,分別采用pET-21a(+)/E.coli或pET-28a(+)/E.coli表達(dá)系分別高效表達(dá)SLA-2-BSP和sβ2m重組蛋白,并對(duì)重組蛋白進(jìn)行純化。通過(guò)生物信息學(xué)的方法,預(yù)測(cè)和合成豬口蹄疫病毒VP1和RNA聚合酶3D中的T細(xì)胞表位多肽,通過(guò)ELISPOT方... 

【文章來(lái)源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

荷包豬SLA-2/肽四聚體構(gòu)建與功能檢測(cè)


MHC-肽四聚體的結(jié)構(gòu)

結(jié)構(gòu)圖,結(jié)構(gòu)圖


MHCII-肽四聚體的結(jié)構(gòu)圖

品系,成熟肽,基因


PCR擴(kuò)增六品系豬SLA-2-BSP成熟肽基因

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]應(yīng)用四聚體技術(shù)檢測(cè)肺結(jié)核患者外周血及病變組織C5特異性CD4+T細(xì)胞[J]. 鄧向斌,黃利榮,謝丹,李研,劉志輝,賴小敏,譚守勇.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2012(13)
[2]應(yīng)用E7多肽/HLA-DR8四聚體監(jiān)測(cè)治療前后肺結(jié)核患者外周血多肽特異性CD4+ T細(xì)胞的變化[J]. 黎意芬,黃利榮,劉國(guó)標(biāo),方毅敏,李研,彭毅,賴小敏.  中國(guó)防癆雜志. 2011(07)
[3]湖南沙子嶺豬SLA-DR基因克隆及生物信息學(xué)分析[J]. 唐醫(yī)亞,邢曉為,薛立群,黃生強(qiáng),王維.  遺傳. 2007(12)
[4]雞MHCIα-生物素化序列融合基因的構(gòu)建、表達(dá)及純化[J]. 劉光亮,童鐵鋼,王群,肖一紅,孟慶文,吳東來(lái).  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2006(05)
[5]四聚體技術(shù)檢測(cè)原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血循環(huán)中抗原特異性T細(xì)胞[J]. 劉海英,張建,鄧安梅,耿紅蓮,周琳,朱燁,徐德興,仲人前.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(01)
[6]BirA酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建、原核表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物的活性鑒定[J]. 李青,吳雄文,熊敏,翁秀芳,盧小玲,梁智輝,龔非力.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2005(05)
[7]加載HCMV抗原肽的HLA-A*0201單體及其四聚體制備和鑒定[J]. 何賢輝,徐麗慧,劉毅,蔡小嫦,曾耀英.  生物工程學(xué)報(bào). 2004(03)



本文編號(hào):2897755

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