發(fā)布時(shí)間：2020-11-18 03:14

　　 慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一種具有氣道氣流受限特征的疾病,其氣流受限不完全可逆、呈進(jìn)行性發(fā)展,與肺部對有害顆粒物或有害氣體異常炎癥反應(yīng)有關(guān)�，F(xiàn)已公認(rèn),慢性持續(xù)性炎癥和氣道重塑是COPD的最主要的病理改變。作為世界第四大致死疾病,研究COPD的防治有著重要意義。 結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)是一種促纖維化生長因子,它可以介導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生和分化,可能成為纖維化疾病治療的新的靶點(diǎn)。 曲尼司特(tranilast)作為一種抗變態(tài)反應(yīng)藥,可以穩(wěn)定肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞的細(xì)胞膜,抑制過敏性物質(zhì)釋放。近年來發(fā)現(xiàn)其與轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、血小板源性生長因子(platelet-derived growth factor,PDGF)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic peptide-1,MCP-1)等細(xì)胞因子有密切聯(lián)系,可抑制臟器纖維化、動(dòng)脈粥樣硬化等。本研究通過曲尼司特對實(shí)驗(yàn)性COPD大鼠模型進(jìn)行干預(yù)研究,以期探討曲尼司特對COPD氣道重塑的可能作用。 第一部分COPD大鼠模型建立及曲尼司特對其形態(tài)學(xué)影響 目的:觀察曲尼司特對COPD實(shí)驗(yàn)大鼠氣道重塑的干預(yù)作用,尤其是對膠原和病理形態(tài)的影響。 方法:將48只SD大鼠隨機(jī)分為模型組和治療組,另取8只SD大鼠作為對照組。模型組和治療組均用煙熏和氣管內(nèi)注入脂多糖的方法建立COPD大鼠模型;每日胃管內(nèi)灌注等量生理鹽水或曲尼司特(400mg·kg-1·d-1);對照組胃管內(nèi)灌注以等量生理鹽水代替。每組動(dòng)物分別于處理后第7d、14d、28d各處死8只進(jìn)行相關(guān)檢測。檢測支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細(xì)胞總數(shù)及細(xì)胞分類;取肺組織作HE染色,行病理形態(tài)學(xué)檢查;天狼猩紅偏振光法觀察大鼠Ⅰ、Ⅲ型膠原分布和沉積情況,并行圖像分析。 結(jié)果:同模型組相比,治療組各組的BALF細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類中巨噬細(xì)胞的比率均明顯下降(P0.05);病理形態(tài)分析提示治療組的氣道壁厚度及腺體厚度/氣道壁厚度、血管壁厚度等均較模型組有所改善(P0.05);與對照組比較,模型組膠原沉積以Ⅰ型為主,28d時(shí)增生明顯;治療組與模型組相比,Ⅰ型膠原的沉積減少,但仍高于對照組。 結(jié)論:曲尼司特可以通過抑制肺內(nèi)巨噬細(xì)胞來減輕氣道炎癥,還可以抑制肺內(nèi)Ⅰ型膠原的合成,從而改善COPD大鼠的氣道重塑。 第二部分曲尼司特對COPD大鼠CTGF表達(dá)的影響 目的:探討曲尼司特對COPD大鼠肺組織中結(jié)締組織生長因子(CTGF)表達(dá)的影響。方法:48只SD大鼠隨機(jī)分為模型組和治療組,另取8只SD大鼠作為對照組。模型組和治療組均用煙熏和氣管內(nèi)注入脂多糖的方法建立COPD大鼠模型;每日胃管內(nèi)灌注等量生理鹽水或曲尼司特(400mg·kg~(-1)·d~(-1));對照組胃管內(nèi)灌注以等量生理鹽水代替。每組動(dòng)物分別于處理后第7d、14d、28d各處死8只。應(yīng)用免疫組化法檢測COPD大鼠CTGF的表達(dá),并與對照組比較。 結(jié)果:對照組及模型7d組和治療7d組肺組織CTGF蛋白均未表達(dá),模型14d組和治療14d組開始表達(dá),28d組表達(dá)最強(qiáng)。但曲尼司特治療28d組(2.8±0.3)與模型28d組(3.8±0.4)相比較,CTGF的表達(dá)減弱(P0.05)。 結(jié)論:脂多糖及煙熏能導(dǎo)致COPD大鼠氣道CTGF表達(dá)增強(qiáng),而曲尼司特能在一定程度上抑制其表達(dá),從而可能減輕COPD的氣道重塑。
【學(xué)位單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2005
【中圖分類】：R563.9
【部分圖文】：

近來許多病理學(xué)和形態(tài)學(xué)的研究進(jìn)一步證實(shí)了這一氣道結(jié)構(gòu)的改變（如圖 1 所示）。圖 1 氣道重塑的示意圖1.2.2 氣道重塑的發(fā)生機(jī)制氣道重塑的發(fā)生機(jī)制尚未完全闡明，但顯然與慢性炎癥密切相關(guān)，支氣管、肺的結(jié)構(gòu)改圖 1 氣道重塑示意圖1.2.2 氣道重塑的發(fā)生機(jī)制氣道重塑的發(fā)生機(jī)制尚未完全闡明，但顯然與慢性炎癥密切相關(guān)，支氣管、肺的結(jié)構(gòu)改變往往是慢性炎癥的后果，二者的發(fā)生機(jī)制也是環(huán)環(huán)相扣的。可以說，氣道重塑這一復(fù)雜過程是從上皮損傷和炎癥反應(yīng)開始的，上皮表型的改變不斷加重和放大這一過程。成纖維細(xì)胞和 ECM 在氣道重塑中起關(guān)鍵作用。ECM 蛋白不僅使氣道壁增厚僵硬，還促使炎性細(xì)胞活化并抑制其凋亡。成纖維細(xì)胞在氣道重塑過程中數(shù)量劇增，極為活躍，能產(chǎn)生膠原及無定形 ECM，使氣道壁纖維化。肌成纖維細(xì)胞還能分化成平滑肌細(xì)胞[23]。生長因子是一類調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂增殖的活性多肽，在氣道平滑肌增殖及 ECM 沉積中起重要作用。炎性細(xì)胞釋放的蛋白酶或化學(xué)因子，可將無活性生長因子前體轉(zhuǎn)為活性型。與氣道重塑關(guān)系較密切的生長因子有 TGF-β、表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor

α、EL-4、ET-1 等都具有上述生物活性。在對哮喘的研究中也發(fā)現(xiàn)：IGF-1 表達(dá)與膠原厚度、成纖維細(xì)胞數(shù)顯著相關(guān)；在含牛血清白蛋白的培養(yǎng)基中，TGF-β、EGF 能增加氣道平滑肌細(xì)胞 DNA 合成以促進(jìn)細(xì)胞分裂增殖。研究表明，氣道慢性炎癥可激活某些細(xì)胞，使其釋放生長因子及其他致纖維化因子，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為成肌纖維細(xì)胞，使細(xì)胞增殖加速并合成、分泌細(xì)胞外基質(zhì)成分，特別是膠原纖維，此種改變是 ECM 增厚的主要原因。2． 結(jié)締組織生長因子的研究進(jìn)展.結(jié)締組織生長因子是新近報(bào)道的高度保守的即刻早期基因 CNN(CTGF，cyr，nov)家族成員之一，該家族包括CTGF(fisp12)、CYR61(cysteinerich61/CEFl0)、Nov(nephro blastomaover expressed)以及最新發(fā)現(xiàn)的 WISP1/elm1、WISP2/rCop1 和 WISP3(WISP、Wntinducible secreted protein)，其中的某些成員與機(jī)體組織的創(chuàng)傷修復(fù)過程密切相關(guān)，而這種關(guān)系是通過細(xì)胞的增殖分化過程中基因調(diào)控的具體形式表現(xiàn)出來的。CTGF 分子量為36～38KD，為一富含半胱氨酸的多肽，含 349 個(gè)氨基酸殘基。編碼人 CTGF 的基因位于染色體 6q23.1，內(nèi)含 5 個(gè)外顯子和 4 個(gè)內(nèi)含子（如圖 2 所示）。CTGF 基因最初是從人的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 cDNA 文庫中克隆到的[31]。CTGF 的主要作用是：①促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂和成纖維細(xì)胞增殖，合成膠原[32]；②介導(dǎo)細(xì)胞趨化作用[33]；③誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[34]；④促進(jìn)血管形成[35]。另外，在正常的生理過程如胚胎發(fā)生、移植及傷口愈合等的 ECM代謝中，CTGF 也起到重要作用。

0123456對照組M7天組M14天組M28天組T7天組T14天組T28天組原/Ⅲ膠ⅠIOD值Ⅲ型膠原*圖 1-4 各組大鼠Ⅰ、Ⅲ型膠原 IOD 值（n=8）與對照組比較 * P＜0.05；與相應(yīng)模型組比較# P＜0.05
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2888266