發(fā)布時(shí)間：2020-11-19 20:13

　　 目的1.構(gòu)建過敏性支氣管哮喘大鼠模型。2.在哮喘大鼠第一次哮喘發(fā)作前給予藥物干預(yù)，探討葛根素對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性哮喘有無預(yù)防作用。3.在哮喘大鼠第一次哮喘發(fā)作后給予藥物干預(yù)，探討葛根素對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性哮喘有無治療作用。 方法1.將20只SPF級(jí)雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和哮喘模型組。哮喘模型組采用OVA（ovalbumin,卵清蛋白）+氫氧化鋁凝膠致敏3次后，OVA激發(fā)1次建模，正常對(duì)照組以NS（normal saline，生理鹽水）為替代品致敏和激發(fā)。建模后通過觀察大鼠行為學(xué)改變，檢測(cè)BALF（broncho-alveolar lavage fluid，支氣管肺泡灌洗液）中炎性細(xì)胞構(gòu)成，肺組織病理學(xué)，細(xì)胞因子水平，血流變，動(dòng)脈血?dú)�，凝血四�?xiàng)等對(duì)模型建立成功與否進(jìn)行評(píng)價(jià)。2.將50只SPF級(jí)雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為5個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別為正常對(duì)照組，哮喘對(duì)照組，哮喘PUE（puerarin,葛根素）預(yù)防組，哮喘PUE+DEX預(yù)防組，哮喘DEX（dexamethasone，地塞米松）預(yù)防組。除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠分別于第0、7、14天腹腔注射OVA+氫氧化鋁凝膠混合物1ml致敏；第21天將大鼠用乙醚麻醉后氣道內(nèi)滴入1%的OVA200μl進(jìn)行激發(fā)。正常對(duì)照組：以NS為替代品進(jìn)行致敏和激發(fā)。自第15天至第20天，各組大鼠分別接受以下干預(yù)：①正常對(duì)照組：1ml NS灌胃+1ml NS腹腔注射；②哮喘對(duì)照組：1ml NS灌胃+1ml NS腹腔注射；③哮喘PUE預(yù)防組：100mg/kg葛根素灌胃+1ml NS腹腔注射；④哮喘PUE+DEX預(yù)防組：100mg/kg葛根素灌胃+0.5mg/kg地塞米松腹腔注射；⑤哮喘DEX預(yù)防組：1ml NS灌胃+0.5mg/kg地塞米松腹腔注射。第22天處死大鼠，檢測(cè)各組大鼠炎癥指標(biāo)（BALF中炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)、肺組織病理學(xué)、炎癥因子等）及凝血指標(biāo)（凝血四項(xiàng)及外源性、內(nèi)源性凝血因子活性等）的改變，評(píng)價(jià)葛根素對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性哮喘有無預(yù)防作用及其療效。3.將50只SPF級(jí)雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為5個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別為正常對(duì)照組，哮喘對(duì)照組，哮喘PUE治療組，哮喘PUE+DEX治療組，哮喘DEX治療組。除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠分別于第0、7、14天腹腔注射OVA+氫氧化鋁凝膠混合物1ml致敏；第21天將大鼠用乙醚麻醉后氣道內(nèi)滴入1%的OVA200μl進(jìn)行激發(fā)；第28天將大鼠用乙醚麻醉后氣道內(nèi)滴入0.5%的OVA200μl激發(fā)。正常對(duì)照組：以NS為替代品進(jìn)行致敏和激發(fā)。自第22天至第27天，各組大鼠分別接受以下干預(yù)：①正常對(duì)照組：1ml NS灌胃+1ml NS腹腔注射；②哮喘對(duì)照組：1ml NS灌胃+1ml NS腹腔注射；③哮喘PUE治療組：100mg/kg葛根素灌胃+1ml NS腹腔注射；④哮喘PUE+DEX治療組：100mg/kg葛根素灌胃+0.5mg/kg地塞米松腹腔注射；⑤哮喘DEX治療組：1ml NS灌胃+0.5mg/kg地塞米松腹腔注射。第29天處死大鼠，檢測(cè)各組大鼠炎癥指標(biāo)（BALF中炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)、肺組織病理學(xué)、炎癥因子等）及凝血指標(biāo)（凝血四項(xiàng)及外源性、內(nèi)源性凝血因子活性等）的改變，評(píng)價(jià)葛根素對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性哮喘有無治療作用及其療效。 結(jié)果1.大鼠哮喘模型觀察：與正常大鼠相比，哮喘大鼠BALF中總細(xì)胞計(jì)數(shù)及嗜酸細(xì)胞百分比(P0.01，P0.01)顯著增高，肺組織病理切片，炎癥因子(TNF-α(P0.01)、IFN-γ(P0.01))，血?dú)夥治?PaO2(P0.05)、SaO2(P0.05))等均有顯著的改變。2.葛根素對(duì)大鼠過敏性哮喘預(yù)防作用觀察：在炎癥指標(biāo)方面，葛根素能夠有效的減輕哮喘大鼠氣道炎癥（BALF中總細(xì)胞計(jì)數(shù)及嗜酸細(xì)胞百分比(P0.01，P0.01)，肺組織病理學(xué)改變顯著減輕，血清IL-10水平升高，肺組織IL-10mRNA基因表達(dá)上調(diào)），但效果不及地塞米松；在凝血指標(biāo)方面，葛根素能夠有效的糾正哮喘大鼠凝血平衡紊亂（PT(P0.01), TT(P0.05), FIB(P0.01)；FII(P0.01), FV(P0.05), FVII(P0.05), FX(P0.05), FVIII(P0.01), FIX(P0.05),FXII(P0.05)），顯著下調(diào)FVII mRNA基因表達(dá)水平(P0.01),且效果優(yōu)于地塞米松。3.葛根素對(duì)大鼠過敏性哮喘治療作用觀察：在炎癥指標(biāo)方面，葛根素能夠有效的減輕哮喘大鼠氣道炎癥（BALF中總細(xì)胞計(jì)數(shù)及嗜酸細(xì)胞百分比(P0.01，P0.01)，肺組織病理學(xué)改變顯著減輕，血清IL-10水平升高，肺組織IL-10mRNA基因表達(dá)顯著上調(diào)(P0.01)），但效果不及地塞米松；在凝血指標(biāo)方面，葛根素能夠有效的糾正哮喘大鼠凝血平衡紊亂（PT(P0.01), TT(P0.05), FIB(P0.05)；FII(P0.05), FVII(P0.05), FX(P0.05), FVIII(P0.01), FXII(P0.01)），顯著下調(diào)FVII mRNA基因表達(dá)水平(P0.01),且效果優(yōu)于地塞米松。 結(jié)論1.本實(shí)驗(yàn)成功的建立了過敏性哮喘大鼠模型；2.葛根素能夠有效地預(yù)防大鼠過敏性哮喘；3.葛根素能夠有效地治療大鼠過敏性哮喘。
【學(xué)位單位】：中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R562.25
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
研究背景
    參考文獻(xiàn)
第一部分 過敏性哮喘大鼠模型的建立
    一. 前言
    二. 實(shí)驗(yàn)材料
    三. 實(shí)驗(yàn)方法
    四. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    五. 討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 過敏性哮喘大鼠模型的優(yōu)化
    一. 前言
    二. 實(shí)驗(yàn)材料
    三. 實(shí)驗(yàn)方法
    四. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    五. 討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 葛根素對(duì)大鼠過敏性哮喘的預(yù)防作用研究
    一. 前言
    二. 實(shí)驗(yàn)材料
    三. 實(shí)驗(yàn)方法
    四. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    五. 討論
    參考文獻(xiàn)
第四部分 葛根素對(duì)大鼠過敏性哮喘的治療作用研究
    一. 前言
    二. 實(shí)驗(yàn)材料
    三. 實(shí)驗(yàn)方法
    四. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    五. 討論
    參考文獻(xiàn)
綜述：過敏性哮喘動(dòng)物模型的研究現(xiàn)狀
    參考文獻(xiàn)
綜述：哮喘與凝血
    參考文獻(xiàn)
附錄：英文縮略詞表
攻讀碩士期間發(fā)表論文
致謝

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2890386