發(fā)布時(shí)間：2020-11-20 20:16

　　 富血小板血漿(Platelet-rich plasma,PRP)是含有數(shù)倍于正常人血小板濃度的自體血漿,當(dāng)它被激活后,可釋放出高濃度的多種生長因子。這些生長因子在促進(jìn)細(xì)胞募集、增殖和分化,生成細(xì)胞外基質(zhì)、膠原蛋白和新血管,促進(jìn)毛囊發(fā)育及延長毛發(fā)生長期等多個(gè)方面中起著重要作用。由于PRP中富含的生長因子具有上述諸多的作用,已在整形外科、創(chuàng)傷骨科、關(guān)節(jié)骨科、口腔科、皮膚科、燒傷科等科室的臨床治療中得到了廣泛的應(yīng)用。傳統(tǒng)的PRP制備方法沒有標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)范,但用不同的方法和裝置制備PRP都有類似的步驟。即首先將添加抗凝劑避免血液凝固,通過第一步低速離心去除紅細(xì)胞和白細(xì)胞,然后通過第二步高速離心去除適量的乏血小板血漿,最后添加促凝劑激活血小板,獲得高濃度的各種生長因子。然而,抗凝劑及促凝劑這些外源性添加劑的使用可能會(huì)帶來一些對(duì)于PRP使用的安全性和有效性的擔(dān)憂。我們提出了一種不需要外源添加抗凝劑和促凝劑、單純通過溫度控制來制備 PRP 的方法———-溫控 PRP(Temperature-controlled PRP,t-PRP),即保持在4 低溫條件下用兩步離心法富集血小板,再通過復(fù)溫至37 ℃使血小板激活,獲得高濃度的生長因子。以傳統(tǒng)方法制作的PRP(Conventional PRP,c-PRP)為對(duì)照,t-PRP在離心富集血小板的過程中,分層更清晰,更有利于去除紅細(xì)胞和白細(xì)胞,且pH值更接近于生理?xiàng)l件(pH = 7.46一7.48),且其血小板濃度是全血的6.58±0.45倍,明顯高于 c-PRP(4.06 ± 0.55 倍)。組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),t-PRP通過37℃復(fù)溫相對(duì)更緩慢地激活后,其中形成了分布均勻的、可網(wǎng)羅住更多的血小板的纖維蛋白網(wǎng)絡(luò),并可能在形成纖維蛋白絲的過程中把生長因子結(jié)合在其中。對(duì)激活后的t-PRP凝膠本身及其析出的生長因子含量的檢測(cè)表明,t-PRP凝膠中包含了更多的生長因子,還表現(xiàn)出緩慢釋放生長因子的特性。此外,t-PRP還具有與c-PRP 一致的功能,其可以促進(jìn)創(chuàng)面愈合,且在此過程中不需要額外添加激活劑,在接觸組織中的膠原蛋白后t-PRP可逐漸自發(fā)激活,凝固成膠并覆蓋創(chuàng)面。說明其對(duì)于臨床使用除了有較好的安全性及有效性以外,還能以液態(tài)涂抹、液態(tài)注射、固態(tài)覆蓋等更多樣的形式被利用。
【學(xué)位單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R644;R943
【部分圖文】：

分別加入２支置于常溫的１５?ｍｌ離心管中，每管各１１?ｍｌ，用于制備ｃ－ＰＲＰ。??１．２．?２．２?ｔ－ＰＲＰ與ｃ－ＰＲＰ的制備與激活??溫控ＰＲＰ?（ｔ－ＰＲＰ）的制備（圖１－１）。抽取的新鮮靜脈血每１０?ｍｌ加入１??支預(yù)冷的１５ｍｌ離心管中，放入己預(yù)冷至４?°Ｃ的離心機(jī)中，配平后，用１８０??Ｘ?ｇ的離心力進(jìn)行低速離心１０分鐘。第一次離心后，可見血液分為上層黃色??稍渾濁的血漿層、中間薄層的白膜層及下層的紅細(xì)胞共３層。把離心管置于試??管冷卻盒中，使用移液槍及已預(yù)冷的槍頭，將位于上層的黃色血漿轉(zhuǎn)移至置于??試管冷卻盒中己預(yù)冷的新１５ｍｌ離心管中，再放入己預(yù)冷至４?°Ｃ的離心機(jī)中，??１６??

?漿之間分界面較清晰，白膜層較薄，而ｃ－ＰＲＰ的各層之間邊界則相對(duì)稍模糊，??在上層黃色的血漿中可見有少量紅細(xì)胞混雜其中（圖１－２）。經(jīng)過第二次高速??離心后，可見ｃ－ＰＲＰ組中與血小板一起沉積于底部的紅細(xì)胞多于ｔ－ＰＲＰ組。??ａ?■?ｇ?；?ｗ??ｒ９?３?—９?三??｜｜Ｈｆ?８?２?——８??８?＇ｉ?ｚｎ￣８．：??Ｋ：?－７?ｌ?—７?ｌ?—１??２?２?＾?＿?ｄ；??１１?■?ｉ?ｉ：?ｉ??ｆ?￣??Ａ?Ｂ?Ｃ??圖１－２?ｔ－ＰＲＰ和ｃ－ＰＲＰ制備的過程（箭頭所指均為ｔ－ＰＲＰ）?？全血（Ａ），第一次離心??后（Ｂ），第二次離心后（Ｃ）。與ｃ－ＰＲＰ組相比，ｔ－ＰＲＰ組的紅細(xì)胞、白細(xì)胞與血漿的界??限更清晰，可見第一次離心后與第二次離心后的血漿中紅細(xì)胞混雜更少。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｔｈｅ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｔ－ＰＲＰ?（Ａｒｒｏｗ）?ａｎｄ?ｃ－ＰＲＰ．?Ｗｈｏｌｅ?ｂｌｏｏｄ?（Ａ），?ａｆｔｅｒ?ｔｈｅ??ｆｉｒｓｔ?ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ?（Ｂ），?ａｆｔｅｒ?ｔｈｅ?ｓｅｃｏｎｄ?ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ?（Ｃ）．?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃ－ＰＲＰ，?ｔｈｅ??ｂｏｕｎｄａｒｉｅｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｒｅｄ?ｂｌｏｏｄ?ｃｅｌｌｓ，?ｗｈｉｔｅ?ｂｌｏｏｄ?ｃｅｌｌｓ?ａｎｄ?ｐｌａｓｍａ?ｗｅｒｅ?ｃｌｅａｒｅｒ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｔ－ＰＲＰ??ｇｒｏｕｐ

?漿之間分界面較清晰，白膜層較薄，而ｃ－ＰＲＰ的各層之間邊界則相對(duì)稍模糊，??在上層黃色的血漿中可見有少量紅細(xì)胞混雜其中（圖１－２）。經(jīng)過第二次高速??離心后，可見ｃ－ＰＲＰ組中與血小板一起沉積于底部的紅細(xì)胞多于ｔ－ＰＲＰ組。??ａ?■?ｇ?；?ｗ??ｒ９?３?—９?三??｜｜Ｈｆ?８?２?——８??８?＇ｉ?ｚｎ￣８．：??Ｋ：?－７?ｌ?—７?ｌ?—１??２?２?＾?＿?ｄ；??１１?■?ｉ?ｉ：?ｉ??ｆ?￣??Ａ?Ｂ?Ｃ??圖１－２?ｔ－ＰＲＰ和ｃ－ＰＲＰ制備的過程（箭頭所指均為ｔ－ＰＲＰ）?？全血（Ａ），第一次離心??后（Ｂ），第二次離心后（Ｃ）。與ｃ－ＰＲＰ組相比，ｔ－ＰＲＰ組的紅細(xì)胞、白細(xì)胞與血漿的界??限更清晰，可見第一次離心后與第二次離心后的血漿中紅細(xì)胞混雜更少。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｔｈｅ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｔ－ＰＲＰ?（Ａｒｒｏｗ）?ａｎｄ?ｃ－ＰＲＰ．?Ｗｈｏｌｅ?ｂｌｏｏｄ?（Ａ），?ａｆｔｅｒ?ｔｈｅ??ｆｉｒｓｔ?ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ?（Ｂ），?ａｆｔｅｒ?ｔｈｅ?ｓｅｃｏｎｄ?ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ?（Ｃ）．?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃ－ＰＲＰ，?ｔｈｅ??ｂｏｕｎｄａｒｉｅｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｒｅｄ?ｂｌｏｏｄ?ｃｅｌｌｓ，?ｗｈｉｔｅ?ｂｌｏｏｄ?ｃｅｌｌｓ?ａｎｄ?ｐｌａｓｍａ?ｗｅｒｅ?ｃｌｅａｒｅｒ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｔ－ＰＲＰ??ｇｒｏｕｐ
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