發(fā)布時(shí)間：2020-11-11 10:37

　　 目的了解剖宮產(chǎn)對(duì)子代情緒發(fā)育的影響及性別特異性,探討與情緒調(diào)節(jié)有關(guān)的關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì)在兩者關(guān)聯(lián)中發(fā)揮的作用。方法(1)建立剖宮產(chǎn)動(dòng)物模型并設(shè)置對(duì)照組,剖宮產(chǎn)組及對(duì)照組的仔鼠在剛出生時(shí)為其選擇代乳鼠,代乳的母鼠體重需與其親生母鼠體重相近。(2)分別在出生后0天(PND 0)、14天(PND 14)、28天(PND 28)、42天(PND 42)和56天(PND 56)稱量剖宮產(chǎn)組和對(duì)照組仔鼠的體重和腦重指標(biāo),并在PND 42、PND 56收集兩組仔鼠的外周血及左半腦組織。(3)采用糖水偏好實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)評(píng)估仔鼠抑郁水平,曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)和高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)仔鼠焦慮水平。糖水偏好實(shí)驗(yàn)分別在PND 42和PND 58進(jìn)行,主要指標(biāo)為糖水偏好率;強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)分別在PND 47和PND 63進(jìn)行,主要評(píng)價(jià)指標(biāo)為靜止時(shí)間、大便粒數(shù);曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)分別在PND 44和PND 60進(jìn)行,主要指標(biāo)為總距離、平均速度、站立次數(shù)、擾首次數(shù)、大便粒數(shù)、中央?yún)^(qū)進(jìn)入次數(shù)及中央?yún)^(qū)停留時(shí)間;高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)分別在PND 45和PND 61進(jìn)行,主要指標(biāo)為開放臂停留時(shí)間、大便粒數(shù)。(4)對(duì)PND 42、PND 56的仔鼠左半腦組織進(jìn)行HE染色,觀察不同性別的兩組仔鼠杏仁核和前額葉皮質(zhì)形態(tài)學(xué)改變。(5)采用ELISA法對(duì)PND 42、PND 56的仔鼠血清多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)、5-羥色胺(5-HT)、5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)等神經(jīng)遞質(zhì)水平進(jìn)行檢測(cè),液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)前額葉區(qū)上述四種神經(jīng)遞質(zhì)的水平。結(jié)果(1)剖宮產(chǎn)組和對(duì)照組的仔鼠,在出生后的各時(shí)點(diǎn)體重和腦重差異均無顯著意義。(2)剖宮產(chǎn)組仔鼠PND 42、PND 58的總體糖水偏好率低于對(duì)照組仔鼠,差異有顯著意義。雄性仔鼠和雌性仔鼠兩個(gè)時(shí)點(diǎn)的糖水偏好率差異均無無顯著意義。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中,兩組仔鼠總體和分性別的靜止時(shí)間、大便粒數(shù)在PND 47無顯著差異;剖宮產(chǎn)總體仔鼠和雄性仔鼠PND 63的靜止時(shí)間顯著高于對(duì)照組總體和對(duì)照組雄性仔鼠。剖宮產(chǎn)仔鼠在成年期有一定程度的抑郁癥狀,雄性仔鼠更為敏感。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中,兩組仔鼠總體和分性別的的總距離、平均速度、大便粒數(shù)、中央?yún)^(qū)進(jìn)入次數(shù)及中央?yún)^(qū)停留時(shí)間等指標(biāo)在PND 44、PND 60時(shí)差異均無顯著意義。剖宮產(chǎn)組總體仔鼠和雌性仔鼠在PND 44的站立次數(shù)和擾首次數(shù)均顯著高于對(duì)照組總體和雌性仔鼠;在PND 60,剖宮產(chǎn)總體仔鼠和雌性仔鼠擾首次數(shù)顯著高于對(duì)照組仔鼠總體和雌性仔鼠,站立次數(shù)在兩組間差異無顯著意義。兩組雄性仔鼠在PND 44、PND 60的站立次數(shù)和擾首次數(shù)均無顯著差異。高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中,兩組仔鼠總體開放臂停留時(shí)間在PND 45、PND 61無顯著差異,不同性別的兩組仔鼠在兩個(gè)時(shí)點(diǎn)該指標(biāo)差異均無顯著意義;兩組仔鼠總體和分性別的大便粒數(shù)在PND 45無顯著差異,剖宮產(chǎn)組仔鼠總體在PND 61大便粒數(shù)高于對(duì)照組,差異有顯著意義。剖宮產(chǎn)仔鼠在青春期和成年期均有一定程度的焦慮癥狀,雌性仔鼠中表現(xiàn)更為明顯。(3)兩組仔鼠在PND 42和PND 56的杏仁核和前額葉皮質(zhì)HE染色的結(jié)果均顯示,對(duì)照組仔鼠的杏仁核和前額葉皮質(zhì)細(xì)胞相對(duì)于剖宮產(chǎn)組仔鼠的杏仁核和前額葉皮質(zhì)細(xì)胞而言結(jié)構(gòu)完整、核仁清晰可見。剖宮產(chǎn)組的前額葉皮質(zhì)區(qū)域輕微細(xì)胞水腫,部分杏仁核和前額葉皮質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)核固縮而深染,有壞死現(xiàn)象。未觀察到明顯的性別差異。(4)PND 42時(shí),剖宮產(chǎn)組仔鼠總體和雌性仔鼠前額葉區(qū)DA和HVA水平均高于對(duì)照組仔鼠,HVA/DA值剖宮產(chǎn)組仔鼠總體和雌性仔鼠顯著高于對(duì)照仔鼠總體和對(duì)照雌性仔鼠;PND56時(shí),剖宮產(chǎn)組仔鼠總體前額葉區(qū)DA和HVA水平均高于對(duì)照組仔鼠,剖宮產(chǎn)組雄性仔鼠DA水平高于對(duì)照組雄性仔鼠,剖宮產(chǎn)組雌性仔鼠HVA水平高于對(duì)照組雌性仔鼠。PND 42時(shí),剖宮產(chǎn)雌性仔鼠前額葉區(qū)5-HT水平低于對(duì)照組雌性仔鼠,剖宮產(chǎn)仔鼠總體和雌性仔鼠5-HIAA水平顯著低于對(duì)照組仔鼠總體和對(duì)照組雌性仔鼠,5-HIAA/5-HT剖宮產(chǎn)組雌性仔鼠顯著高于對(duì)照組雌性仔鼠;PND 56時(shí),剖宮產(chǎn)仔鼠總體和雌性仔鼠5-HT水平顯著低于對(duì)照組仔鼠總體和對(duì)照組雌性仔鼠,剖宮產(chǎn)組雌性仔鼠5-HIAA水平顯著低于對(duì)照組雌性仔鼠,剖宮產(chǎn)仔鼠總體、雄性仔鼠和雌性仔鼠5-HIAA/5-HT均顯著高于對(duì)照。PND 42時(shí),剖宮產(chǎn)組仔鼠總體、雄性仔鼠和雌性仔鼠血清HVA水平顯著高于對(duì)照;PND56時(shí),剖宮產(chǎn)組仔鼠總體、雄性仔鼠和雌性仔鼠DA和HVA水平顯著高于對(duì)照。PND 42時(shí),剖宮產(chǎn)組仔鼠總體和雌性仔鼠血清5-HT水平顯著高于對(duì)照,剖宮產(chǎn)組仔鼠總體、雄性仔鼠和雌性仔鼠血清5-HIAA水平顯著高于對(duì)照。PND 56時(shí),剖宮產(chǎn)組仔鼠總體、雄性仔鼠和雌性仔鼠血清5-HIAA水平顯著高于對(duì)照。結(jié)論剖宮產(chǎn)仔鼠在青春期和成年期均存在一定的焦慮和抑郁樣行為,雄性仔鼠對(duì)抑郁癥狀敏感,雌性仔鼠傾向于焦慮癥狀,并伴有情緒調(diào)控關(guān)鍵腦區(qū)的形態(tài)學(xué)改變。關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì)水平的變化可能部分解釋分娩方式在子代情緒發(fā)育異常中的作用。
【學(xué)位單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R179
【部分圖文】：

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文剖宮產(chǎn)組和對(duì)照組仔鼠不同時(shí)點(diǎn)杏仁核與前額葉區(qū) HE 染色結(jié)果1 剖宮產(chǎn)組和對(duì)照組仔鼠不同時(shí)點(diǎn)杏仁核 HE 染色結(jié)果兩組小鼠在 PND 42 和 PND 56 的杏仁核 HE 染色的結(jié)果均顯示，對(duì)照組仁核細(xì)胞相對(duì)于剖宮產(chǎn)組仔鼠的杏仁核細(xì)胞而言結(jié)構(gòu)完整、核仁清晰可產(chǎn)組的杏仁核區(qū)域部分神經(jīng)元出現(xiàn)萎縮，細(xì)胞核固縮而深染，有壞死現(xiàn)觀察到明顯性別差異。見圖 11-12。

圖 12 剖宮產(chǎn)組和對(duì)照組仔鼠 PND 56 的杏仁核 HE 染色形態(tài)剖宮產(chǎn)組雄性仔鼠；B：對(duì)照組雄性仔鼠；C：剖宮產(chǎn)組雌性仔鼠；D：對(duì)照組雌性ig. 12 HE staining of the amygdalas in caesarean section group and control group at PNDA: male offspring in caesarean section group; B: male offspring in control group; C: femaoffspring in caesarean section group; D: female offspring in control group2 剖宮產(chǎn)組和對(duì)照組仔鼠不同時(shí)點(diǎn)前額葉區(qū) HE 染色結(jié)果兩組小鼠在 PND 42 和 PND 56 的前額葉皮質(zhì) HE 染色的結(jié)果顯示，對(duì)照前額葉皮質(zhì)細(xì)胞相對(duì)于剖宮產(chǎn)組仔鼠的前額葉皮質(zhì)細(xì)胞而言結(jié)構(gòu)完整、可見。剖宮產(chǎn)組的前額葉皮質(zhì)區(qū)域輕微細(xì)胞水腫，部分神經(jīng)元出現(xiàn)核固，有壞死現(xiàn)象。暫未觀察到明顯性別差異。見圖 13-14。

圖 13 剖宮產(chǎn)組和對(duì)照組仔鼠 PND 42 的前額葉皮質(zhì) HE 染色形態(tài)剖宮產(chǎn)組雄性仔鼠；B：對(duì)照組雄性仔鼠；C：剖宮產(chǎn)組雌性仔鼠；D：對(duì)照組雌性. 13 HE staining of the prefrontal cortex in caesarean section group and control group at PNA: male offspring in caesarean section group; B: male offspring in control group; C: femaoffspring in caesarean section group; D: female offspring in control group
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