發(fā)布時(shí)間：2020-07-06 13:24

【摘要】：目的:探求地黃飲子干預(yù)阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)和帕金森病(Parkinson disease,PD)腎虛髓空證模型大鼠的方證效應(yīng)機(jī)制,部分揭示地黃飲子干預(yù)AD與PD腎虛髓空證異病同治的生物學(xué)機(jī)制。方法:(1)通過復(fù)習(xí)文獻(xiàn)中傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)AD、PD病因病機(jī)和發(fā)病機(jī)制的理論認(rèn)識(shí),梳理疾病、證候、證候要素間的關(guān)系,闡明地黃飲子治療AD與PD腎虛髓空證異病同證的依據(jù)。(2)復(fù)制病證結(jié)合動(dòng)物模型:利用氫化可的松溶液灌胃的方法復(fù)制中醫(yī)腎虛髓空證動(dòng)物模型,同時(shí)結(jié)合海馬CA1區(qū)定位注射Aβ_(25-35)多肽片段復(fù)制AD疾病動(dòng)物模型,頸背部皮下注射魚藤酮溶液復(fù)制PD疾病動(dòng)物模型,最終分別制備為AD、PD病證結(jié)合模型,造模成功后用地黃飲子對(duì)AD、PD病證結(jié)合模型進(jìn)行干預(yù)。(3)采用行為學(xué)測(cè)試法、酶聯(lián)免疫法、HE染色、蛋白免疫印跡法和實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄--聚合鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù),觀察AD與PD病證結(jié)合動(dòng)物模型的行為學(xué)變化、形態(tài)學(xué)變化、HPA軸功能變化、腦組織抗氧化水平、泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin proteasome system,UPS)功能變化及地黃飲子的干預(yù)作用。結(jié)果1.理論研究:(1)近代醫(yī)家認(rèn)為AD與PD均屬衰老性疾病,病位在腦,腎虛是其共同的證候要素,屬中醫(yī)學(xué)異病同證的范疇。補(bǔ)腎名方—地黃飲子具有滋腎陰,補(bǔ)腎陽(yáng),化痰開竅的作用,可用于AD、PD腎虛髓空證的治療。(2)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為衰老引起的泛素蛋白酶體系統(tǒng)功能衰退是AD與PD共同的發(fā)病機(jī)制之一,而現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合關(guān)于腎實(shí)質(zhì)的研究成果更將衰老定義為生理性腎虛,故生理性腎虛與泛素蛋白酶體系統(tǒng)功能的衰退密切相關(guān)。2.實(shí)驗(yàn)研究:(1)行為學(xué)測(cè)試結(jié)果:AD模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及空間探索能力受損嚴(yán)重,地黃飲子可以顯著改善AD干預(yù)組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力;PD模型組大鼠四肢的肌力及協(xié)調(diào)平衡能力降低,地黃飲子可以明顯提高PD干預(yù)組大鼠四肢的肌力及協(xié)調(diào)平衡能力。(2)HPA軸功能檢測(cè)結(jié)果:AD模型組、PD模型組大鼠血清中CTH、ACTH、CORT含量顯著升高,證明腎虛髓空證候模型制備成功,經(jīng)地黃飲子干預(yù)后,AD干預(yù)組、PD干預(yù)組大鼠血清中CTH、ACTH、CORT含量顯著降低,表明地黃飲子可以抑制HPA軸功能虛性亢進(jìn),對(duì)AD、PD腎虛髓空證候模型具有干預(yù)作用。(3)腦組織抗氧化水平檢測(cè)結(jié)果:AD模型組、PD模型組大鼠腦勻漿中MAO、Lipo含量明顯升高,表明腦組織抗氧化水平降低,衰老模型誘導(dǎo)成功,經(jīng)地黃飲子干預(yù)后AD干預(yù)組、PD干預(yù)組大鼠腦組織中MAO、Lipo含量顯著降低,表明地黃飲子可以提高AD、PD干預(yù)組大鼠腦組織抗氧化水平,抑制大鼠腦組織老化,對(duì)AD、PD腎虛髓空證模型具有干預(yù)作用。(4)HE染色結(jié)果:AD模型大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞層數(shù)減少,細(xì)胞空泡樣變性顯著,地黃飲子可增加AD干預(yù)組大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞層數(shù),減輕細(xì)胞空泡樣變性;PD模型大鼠黑質(zhì)區(qū)DA能神經(jīng)元數(shù)目減少,膠質(zhì)細(xì)胞增多,地黃飲子使PD干預(yù)組大鼠黑質(zhì)區(qū)DA能神經(jīng)元數(shù)目增多,膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目減少。(5)RT-PCR檢測(cè)UPS mRNA檢測(cè)結(jié)果:AD模型—海馬、PD模型—黑質(zhì)、紋狀體中Ub、E1、UCH-L1及20S蛋白酶體mRNA的表達(dá)量降低,表明UPS功能降低,經(jīng)地黃飲子干預(yù)后,AD干預(yù)組—海馬、PD干預(yù)組—黑質(zhì)、紋狀體中Ub、E1、UCH-L1及20S蛋白酶體mRNA的表達(dá)量增加,表明地黃飲子可以提高各組大鼠UPS的功能。(6)Western-blot檢測(cè)UPS蛋白表達(dá)結(jié)果:AD模型—海馬、PD模型—黑質(zhì)、紋狀體中Ub、E1、UCH-L1及20S蛋白酶體的蛋白表達(dá)量減少,表明UPS功能減退,經(jīng)地黃飲子干預(yù)后,AD干預(yù)組—海馬、PD干預(yù)組—黑質(zhì)、紋狀體中Ub、E1、UCH-L1及20S蛋白酶體蛋白的表達(dá)量增加,表明地黃飲子可以改善各組大鼠的UPS功能。結(jié)論:1.給予Wistar大鼠氫化可的松溶液灌胃結(jié)合海馬CA1區(qū)定位注射Aβ_(25-35)多肽片段可以成功復(fù)制阿爾茨海默病腎虛髓空證病證結(jié)合模型。2.給予Wistar大鼠氫化可的松溶液灌胃結(jié)合頸背部皮下注射魚藤酮溶液可以成功復(fù)制帕金森病腎虛髓空證病證結(jié)合模型。3.以衰老(生理性腎虛)引起的HPA軸功能虛性亢進(jìn)、腦組織抗氧化水平降低、UPS衰退是AD、PD模型大鼠腎虛髓空證的內(nèi)在機(jī)制,其中地黃飲子改善UPS降解功能是其干預(yù)AD與PD腎虛髓空證--異病同治的部分生物學(xué)機(jī)制。4.地黃飲子干預(yù)AD和PD腎虛髓空證共同的方證效應(yīng)機(jī)制可能是:調(diào)控HPA軸功能虛性亢進(jìn)、提高腦組織抗氧化水平、恢復(fù)泛素蛋白酶體系統(tǒng)降解功能。
【學(xué)位授予單位】：山西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5;R-332
【圖文】：

圖 1 AD 大鼠空間探索測(cè)試結(jié)果注：與正常對(duì)照組比較，**P <0.01；與假手術(shù)組比較，△△P <0.01）AD 大鼠 HPA 軸檢測(cè)結(jié)果 3 可知：與正常對(duì)照組相比，假手術(shù)組大鼠血清中 ACTH、CORT、CR

AD大鼠HPA軸功能測(cè)定結(jié)果

圖 3 AD 各組大鼠 MAO、Lipo 檢測(cè)結(jié)果注：與正常對(duì)照組比較，**P <0.01；與假手術(shù)組比較，△△P <0.01（四）AD 大鼠海馬組織鏡檢結(jié)果正常對(duì)照組海馬組織 CA1 區(qū)細(xì)胞排列緊密整齊，層數(shù)為 3-4 層，核仁深染

【參考文獻(xiàn)】

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1 馬濤;徐世軍;閆妍;張文生;;地黃飲子對(duì)阿爾茨海默病小鼠神經(jīng)炎性損傷的改善作用[J];成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2015年04期

2 祖文;賈納;賽那;楊敏;顧艷麗;;帕金森病發(fā)病機(jī)制及治療藥物的研究進(jìn)展[J];北方藥學(xué);2015年07期

3 丁宏娟;何建成;;復(fù)方地黃方對(duì)帕金森病左旋多巴毒副反應(yīng)大鼠酪氨酸羥化酶變化的影響[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2015年10期

4 侯雪芹;陳云波;程淑意;段文君;方淑環(huán);王奇;;補(bǔ)腎益智提取物對(duì)AD小鼠空間學(xué)習(xí)記憶及氧化應(yīng)激-凋亡相關(guān)機(jī)制的研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2015年05期

5 彭艷;錢海霞;白雪;;阿爾茨海默病動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J];中國(guó)中醫(yī)藥科技;2014年05期

6 戴明;袁曉霞;;從病因病機(jī)分析地黃飲子治療顫證驗(yàn)案[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2014年18期

7 蔡鑫昆;吳林;畢信亞;王清碧;趙海濤;麻曉梅;;從肺探討帕金森病病因病機(jī)[J];遼寧中醫(yī)雜志;2014年07期

8 成金枝;張俊龍;郭蕾;;地黃飲子對(duì)Alzheimer’s disease和Parkinson’s disease大鼠T-SOD、LPO的影響[J];陜西中醫(yī);2014年07期

9 羅維國(guó);;地黃飲子對(duì)阿爾茨海默病的研究進(jìn)展[J];中醫(yī)臨床研究;2014年17期

10 李霞;李靜;王永鳳;董保霞;張美英;劉礦平;吳培秀;楊繼軍;;電針對(duì)帕金森大鼠行為學(xué)和中腦黑質(zhì)TH的影響[J];河北醫(yī)藥;2014年04期

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1 許海;;淺議中醫(yī)腎虛證與下丘腦-垂體-內(nèi)分泌軸的關(guān)系[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中醫(yī)藥傳承創(chuàng)新與發(fā)展研討會(huì)專輯[C];2007年

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1 張娜;地黃飲子對(duì)AD的治療作用及調(diào)節(jié)CREB/PGC-1α通路改善線粒體功能的機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2017年

2 吉云鵬;補(bǔ)腎治法對(duì)腎虛大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞增殖機(jī)制的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年

3 趙彩燕;帕病1號(hào)方治療早期帕金森病的臨床研究及作用機(jī)制探討[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2013年

4 于嵩;姜黃素對(duì)帕金森病及阿爾茨海默病神經(jīng)元保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

5 孔明望;補(bǔ)腎化痰法對(duì)Alzheimer病模型大鼠泛素—蛋白酶體通路的影響[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2007年

6 張曉雷;加減地黃飲子治療阿爾茨海默型癡呆（AD）的臨床研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2006年

7 牛英才;地黃飲子對(duì)老年性癡呆模型大鼠行為學(xué)及相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2005年

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1 劉鶴;加減地黃飲子治療腎虛髓減型老年性癡呆的臨床觀察[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 孟志偉;三甲復(fù)脈湯對(duì)帕金森大鼠多巴胺神經(jīng)元的影響研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2014年

3 何方;電針對(duì)帕金森病模型大鼠泛素—蛋白酶體系統(tǒng)的影響[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2013年

4 李長(zhǎng)祿;腎虛型老年癡呆大鼠模型的建立及藥物驗(yàn)證[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

5 張楊;地黃飲子對(duì)快速老化小鼠P8（SAMP8）定位導(dǎo)航學(xué)習(xí)記憶及氧化應(yīng)激的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2010年

6 周素方;六味地黃丸治療帕金森病作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

7 高小威;安顫靈對(duì)帕金森病大鼠模型泛素—蛋白酶體系統(tǒng)的影響[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2007年

8 高博;異病同證理論探討[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2006年

9 周妍妍;地黃飲子對(duì)癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶、酶學(xué)及生長(zhǎng)抑素表達(dá)影響的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2004年

本文編號(hào)：2743693