發(fā)布時間：2024-11-03 14:06

　　L-色氨酸（L-tryptophan,L-Trp）是人類和動物體內(nèi)需要的必需氨基酸之一,廣泛應(yīng)用于食品添加劑、飼料以及醫(yī)藥等行業(yè)。利用微生物進(jìn)行發(fā)酵來生產(chǎn)L-Trp的方法鑒于其操作過程簡單、原材料廉價、終產(chǎn)物L(fēng)-Trp易提取純化等諸多優(yōu)點(diǎn)而越來越受到青睞。近些年來,國外研究者采用化學(xué)誘變結(jié)合基因工程的手段,逐步選育出大量的具有較高L-Trp生產(chǎn)能力的工程菌株,但其在發(fā)酵生產(chǎn)過程中仍然存在一些問題,比如副產(chǎn)物積累,產(chǎn)物得率低等,這限制了L-Trp工業(yè)化生產(chǎn)水平的進(jìn)一步提高。本論文在實驗室前期工作的基礎(chǔ)之上,以已構(gòu)建的色氨酸生產(chǎn)菌株E.coli FB-04為出發(fā)菌株,通過進(jìn)一步的基因操作進(jìn)行該菌株的改造。此外,通過代謝組學(xué)的研究方法對菌體胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行主成分分析,探究基因工程改造對胞內(nèi)物質(zhì)主成分的影響,進(jìn)而分析由基因工程改造所引起的L-Trp合成過程中代謝流的變化,為菌株的進(jìn)一步優(yōu)化與改良提供理論依據(jù)。主要的研究內(nèi)容及結(jié)果如下:（1）以L-色氨酸生產(chǎn)菌株E.coli FB-04為出發(fā)菌株,采用Red同源重組技術(shù)分別對全局調(diào)控蛋白FruR、Crp、FlhD及TyrR編碼基因fruR,flhD,c...

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

即D,L-α-氨基-β-吲哚基丙酸見圖1-1，相對分子質(zhì)量為204.2，其中左旋光體即L-Trp，具有生末，無味，熔點(diǎn)為289℃，常溫下，在堿性溶液中比較穩(wěn)定[1]。

江南大學(xué)博士學(xué)位論文4圖1-2大腸桿菌中L-Trp的合成途徑及反饋調(diào)控Fig.1-2Metabolicpathwaysandfeedback-regulationforbiosynthesisofL-TrpinE.coli1.3.2微生物合成L-色氨....

[54]。圖1-3大腸桿菌乙酸的合成途徑Fig.1-3AcetatebiosynthesispathwayinE.coli

圖2-1Red重組系統(tǒng)進(jìn)行基因敲除的框架圖Fig.2-1SchematicdiagramofRedrecombinationmethodforgenedeletion2-1的方法，利用Red重組系統(tǒng)分別進(jìn)行大腸桿菌crp、fruR、單敲除....

本文編號：4011393