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大腸桿菌L-色氨酸生產(chǎn)菌株基因工程改造及代謝調(diào)控研究

發(fā)布時(shí)間:2024-11-03 14:06
  L-色氨酸(L-tryptophan,L-Trp)是人類和動(dòng)物體內(nèi)需要的必需氨基酸之一,廣泛應(yīng)用于食品添加劑、飼料以及醫(yī)藥等行業(yè)。利用微生物進(jìn)行發(fā)酵來生產(chǎn)L-Trp的方法鑒于其操作過程簡(jiǎn)單、原材料廉價(jià)、終產(chǎn)物L(fēng)-Trp易提取純化等諸多優(yōu)點(diǎn)而越來越受到青睞。近些年來,國(guó)外研究者采用化學(xué)誘變結(jié)合基因工程的手段,逐步選育出大量的具有較高L-Trp生產(chǎn)能力的工程菌株,但其在發(fā)酵生產(chǎn)過程中仍然存在一些問題,比如副產(chǎn)物積累,產(chǎn)物得率低等,這限制了L-Trp工業(yè)化生產(chǎn)水平的進(jìn)一步提高。本論文在實(shí)驗(yàn)室前期工作的基礎(chǔ)之上,以已構(gòu)建的色氨酸生產(chǎn)菌株E.coli FB-04為出發(fā)菌株,通過進(jìn)一步的基因操作進(jìn)行該菌株的改造。此外,通過代謝組學(xué)的研究方法對(duì)菌體胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行主成分分析,探究基因工程改造對(duì)胞內(nèi)物質(zhì)主成分的影響,進(jìn)而分析由基因工程改造所引起的L-Trp合成過程中代謝流的變化,為菌株的進(jìn)一步優(yōu)化與改良提供理論依據(jù)。主要的研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:(1)以L-色氨酸生產(chǎn)菌株E.coli FB-04為出發(fā)菌株,采用Red同源重組技術(shù)分別對(duì)全局調(diào)控蛋白FruR、Crp、FlhD及TyrR編碼基因fruR,flhD,c...

【文章頁數(shù)】:118 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

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即D,L-α-氨基-β-吲哚基丙酸見圖1-1,相對(duì)分子質(zhì)量為204.2,其中左旋光體即L-Trp,具有生末,無味,熔點(diǎn)為289℃,常溫下,在堿性溶液中比較穩(wěn)定[1]。


大腸桿菌L-色氨酸生產(chǎn)菌株基因工程改造及代謝調(diào)控研究



江南大學(xué)博士學(xué)位論文4圖1-2大腸桿菌中L-Trp的合成途徑及反饋調(diào)控Fig.1-2Metabolicpathwaysandfeedback-regulationforbiosynthesisofL-TrpinE.coli1.3.2微生物合成L-色氨....


大腸桿菌L-色氨酸生產(chǎn)菌株基因工程改造及代謝調(diào)控研究



[54]。圖1-3大腸桿菌乙酸的合成途徑Fig.1-3AcetatebiosynthesispathwayinE.coli


大腸桿菌L-色氨酸生產(chǎn)菌株基因工程改造及代謝調(diào)控研究



圖2-1Red重組系統(tǒng)進(jìn)行基因敲除的框架圖Fig.2-1SchematicdiagramofRedrecombinationmethodforgenedeletion2-1的方法,利用Red重組系統(tǒng)分別進(jìn)行大腸桿菌crp、fruR、單敲除....



本文編號(hào):4011393

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