玉米單倍體自然加倍遺傳及育性恢復(fù)主效QTL定位研究
本文關(guān)鍵詞:玉米單倍體自然加倍遺傳及育性恢復(fù)主效QTL定位研究
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【摘要】:雙單倍體(doubled haploid,DH)育種能夠顯著縮短選系時間,并且能夠加快育種進程,被認為是現(xiàn)代玉米育種的關(guān)鍵技術(shù)之一。但長久以來單倍體技術(shù)的廣泛推廣主要受到很低的單倍體自然加倍率的影響,而其核心限制因素主要是較低的雄穗自然加倍率,即雄穗育性自然恢復(fù)效率,在非人工處理的情況下,玉米單倍體雄穗育性恢復(fù)效率往往不到10%。而且以往的研究還發(fā)現(xiàn)玉米單倍體的雄穗育性恢復(fù)能力與遺傳因素顯著相關(guān)。因此,深入細致地進行單倍體雄穗育性恢復(fù)的遺傳研究,挖掘控制單倍體雄穗育性恢復(fù)的主效QTL是提高單倍體自然加倍效率的關(guān)鍵。本研究通過系統(tǒng)分析玉米單倍體育性恢復(fù)遺傳特征,深入發(fā)掘相關(guān)QTL位點,將為分子標記輔助選擇選育高通量DH系提供有效的功能標記,最終為開展規(guī);疍H育種的分子生物學(xué)研究提供科學(xué)依據(jù)。本研究主要結(jié)果如下:(1)利用高頻單倍體雄穗育性恢復(fù)自交系豫87-1和4F1分別與低頻育性恢復(fù)自交系鄭58構(gòu)建不同遺傳背景的單倍體群體,對田間單倍體雄穗露藥得分(Anther emergence score,AES)進行調(diào)查,選擇散粉表型最好的單株(AES為1),結(jié)合SSR分子標記,利用偏分離定位的方法,對單倍體雄穗育性恢復(fù)性狀進行遺傳研究。通過多年多點的實驗,在豫87-1/鄭58群體初步定位到四個與單倍體雄穗育性恢復(fù)相關(guān)的QTL位點,分別位于玉米第1、3、4和6號染色體上。除了qhmf1來自于低頻育性恢復(fù)材料鄭58外,其余三個QTL位點都來自于高頻育性恢復(fù)材料。在這些位點當(dāng)中,qhmf1、qhmf2和qhmf4均能在4F1/鄭58單倍體群體中檢測到,而且位于六號染色體的qhmf4位點在兩個群體中偏分離表現(xiàn)最顯著,因此qhmf4被認為是控制單倍體雄穗育性恢復(fù)的關(guān)鍵位點。與此同時,本研究還利用單倍體群體偏分離定位的方法,在相同遺傳背景材料中對已經(jīng)定位的控制株高的QTL位點進行驗證,證明了單倍體偏分離方法的有效性。(2)在qhmf4初定位的研究基礎(chǔ)上,通過繼續(xù)利用豫87-1和鄭58組配的不同世代的單倍體回交群體(Haploid Backcross,HB),結(jié)合雙親序列特征開發(fā)的10個InDel分子標記和基于子代測驗的精細定位策略,最終將qhmf4定位在標記IND1658和IND167之間,兩個標記之間的物理距離大約為1.2Mb。通過對此區(qū)間的候選基因進行生物信息學(xué)分析,認為控制第一次減數(shù)分裂缺失基因afd1是最可能的候選基因。(3)通過對國外主要遺傳材料進行篩選,得到高頻單倍體雄穗育性恢復(fù)材料GF1和低頻單倍體雄穗育性恢復(fù)材料GF3和GF5,對單倍體雄穗育性恢復(fù)進行遺傳研究。通過組配GF1/GF3的F1單倍體分離群體,結(jié)合6K SNP芯片分子標記和SSR標記,利用偏分離定位的方法和復(fù)合區(qū)間作圖法,在玉米第1、5和6號染色體上分別定位到三個與玉米單倍體雄穗育性恢復(fù)相關(guān)的QTL位點,其中位于5號染色體的qshgd1為主效位點,該位點在GF5與GF1組配的F1單倍體群體中得到驗證。以上定位結(jié)果說明單倍體雄穗育性恢復(fù)受到多個QTL位點的影響。(4)利用正常二倍體花粉對國內(nèi)22個主要骨干自交系來源的單倍體雌穗進行多次授粉,根據(jù)結(jié)實株率和平均結(jié)實籽粒數(shù)評價單倍體雌穗育性恢復(fù)能力,結(jié)果表明單倍體雌穗育性恢復(fù)也同樣受到基因型的顯著影響。單倍體雌穗平均結(jié)實株率是89.54%,變異范圍是73.56-99.18%;單倍體雌穗平均結(jié)實籽粒數(shù)是15.4,變異范圍是2.67-59.82。對廣義遺傳率進行估計,單倍體雌穗結(jié)實株率的遺傳率為0.67,平均結(jié)實籽粒數(shù)的遺傳率為0.86。利用聚類分析進行多重比較,發(fā)現(xiàn)在檢測的22個自交系材料中,B73的單倍體雌穗育性恢復(fù)能力較其他材料強,雜種優(yōu)勢類群中瑞德類群的單倍體雌穗育性恢復(fù)能力普遍較好。
【學(xué)位授予單位】:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:S513
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1 吳鵬昊;玉米生物誘導(dǎo)單倍體雄穗育性恢復(fù)研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年
,本文編號:1274134
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