發(fā)布時(shí)間：2016-11-23 09:50

  本文關(guān)鍵詞：海洛因成癮的檢測方法及其神經(jīng)病理學(xué)特征研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《蘭州大學(xué)》 2015年

海洛因成癮的檢測方法及其神經(jīng)病理學(xué)特征研究

柴爾青  

【摘要】：目的：以Wistar大鼠為研究對象,建立海洛因成癮動(dòng)物模型及海洛因代謝產(chǎn)物的檢測方法,研究海洛因成癮對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的毒性作用,探索海洛因成癮的生理、生化機(jī)制,為臨床手術(shù)麻醉品的合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。方法：1.采用依次遞增給藥法,建立海洛因成癮大鼠模型。即第1天,每只大鼠每次海洛因10.00 mg/kg,每天2次,肌肉注射；第2天以后,每次增加5.00 mg/kg,在連續(xù)注射第7天時(shí),每天劑量達(dá)135.00mg/kg,維持該劑量持續(xù)7天,建立海洛因成癮大鼠模型。2.采用氣-質(zhì)聯(lián)用分析法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry Analysis, GC-MS)測定海洛因代謝產(chǎn)物。3.建立海洛因代謝產(chǎn)物的簡易檢測法。主要包括顯色法、薄層層析法、高效毛細(xì)管電泳法。4.采用免疫組化法檢測海洛因成癮對實(shí)驗(yàn)大鼠腦組織Bax c-fos表達(dá)的影響。5.給予利血平后,再給予海洛因,觀察動(dòng)物成癮情況。用放射免疫法檢測血液和腦組織中腎上腺素(adrenaline, A)、去甲腎上腺素(noradrenaline, NA)、多巴胺(dopamine, DA)、環(huán)磷酸腺苷(cAMP)及環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)的表達(dá)水平。6.采用Dossy-2H多通路生理參數(shù)采集存儲(chǔ)系統(tǒng),檢測給予海洛因和／或利血平后大鼠的腦電圖、心電圖和肌梭放電圖的變化情況。結(jié)果：1.在末次給予海洛因次日,腹腔注射鹽酸納洛酮(4.00 mg/kg) 2h后,大鼠出現(xiàn)扭體、濕狗樣顫抖、咬牙、跳躍、站立等戒斷癥狀,成癮動(dòng)物模型建立成功。2.GC-MS檢測發(fā)現(xiàn),海洛因在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物主要有嗎啡和6-單乙酰嗎啡。3.用顯色法、薄層層析法和高效毛細(xì)管電泳法檢測海洛因代謝產(chǎn)物—嗎啡效果靈敏,操作簡單易行。4.免疫組化法檢測發(fā)現(xiàn),海洛因組腦組織中Bax、c-fos表達(dá)陽性細(xì)胞比對照組明顯增多(P0.01),IOD(積分吸光度)和MA(平均吸光)均顯著增強(qiáng)(P0.01)。5.通過放射免疫法檢測分析表明,(1)與對照組相比較,海洛因組和利血平組血液cAMP的表達(dá)水平均顯著上升(P0.01),且利血平組的上升幅度較海洛因組的大；海洛因組(P0.05)和利血平組(P0.05)血液cGMP的表達(dá)水平均下降,且利血平組的下降幅度也較海洛因組的大；海洛因組和利血平組血液A和NA的表達(dá)水平均發(fā)生變化,但是,海洛因組的是均均顯著上升(P0.01),而利血平組的則是均顯著下降(P0.01)。(2)與對照組相比較,海洛因組和利血平組中腦腹側(cè)被蓋區(qū)、大腦前額葉皮層及海馬中cAMP的表達(dá)水平均極顯著地上升(P0.01),而且利血平組上述各組織中cAMP的表達(dá)水平也均高于海洛因組的；利血平組上述各組織中cGMP的表達(dá)水平均極顯著地下降(P0.01),而海洛因組上述各組織中cGMP的表達(dá)水平也是均下降的,但是在中腦腹側(cè)被蓋區(qū)(P0.01)中的下降幅度較大腦前額葉皮層和海馬(P0.05)的更顯著,總體而言,利血平組上述各組織中cGMP表達(dá)水平的下降幅度均較海洛因組的大。(3)與對照組相比較,利血平組大腦前額葉皮層、海馬區(qū)、紋狀體及伏隔核中DA的表達(dá)水平均極顯著下降(P0.01),而且利血平組上述各組織中DA的表達(dá)水平也均低于海洛因組的；海洛因組大腦前額葉皮層、海馬區(qū)及伏隔核中DA的表達(dá)水平均是上升的,而在大腦前額葉皮層和伏隔核(P0.01)中的上升幅度較海馬區(qū)(P0.05)的更顯著,但是,紋狀體中DA的表達(dá)水平確是下降的(P0.05)；利血平組上述各組織中DA的表達(dá)水平均低于海洛因組的。6.神經(jīng)生理學(xué)研究發(fā)現(xiàn),海洛因成癮大鼠的腦電圖、心電圖和肌梭放電圖均發(fā)生明顯的改變。結(jié)論：1.自擬“快速海洛因成癮動(dòng)物模型的建立”方法,建模時(shí)間短,戒斷癥狀明顯,操作簡單易行。2.用顯色法、薄層層析法和高效毛細(xì)管電泳法檢測海洛因代謝產(chǎn)物(嗎啡或單乙酰嗎啡)效果靈敏,操作簡單易行。3.海洛因成癮顯著上調(diào)腦組織中Bax和c-Fox的表達(dá),而導(dǎo)致腦組織損傷。4.大腦前額葉皮層、中腦腹側(cè)被蓋區(qū)、海馬、紋狀體及伏隔核均參與了海洛因成癮過程。5.海洛因成癮將會(huì)改變成癮動(dòng)物血液和腦組織中與DA系統(tǒng)調(diào)節(jié)相關(guān)激素、神經(jīng)遞質(zhì)等因子的表達(dá)水平；運(yùn)用藥物利血平干預(yù)后,盡管海洛因吸食者血液和腦組織中與DA系統(tǒng)調(diào)節(jié)相關(guān)激素、神經(jīng)遞質(zhì)等因子的表達(dá)水平也發(fā)生一定的變化,但其干預(yù)將會(huì)改善動(dòng)物成癮戒斷的癥狀。6.海洛因成癮將會(huì)不同程度的影響成癮動(dòng)物腦、心臟及肌梭的正常生理功能。7.DA系統(tǒng)在海洛因成癮過程中發(fā)揮著非常重要的作用,海洛因成癮機(jī)制：海洛因→6-乙酰嗎啡→受體→G蛋白→AC→ATP→cAMP→PKA→DA、EP、NE合成和釋放→靶器官(成癮、戒斷癥狀)。該研究結(jié)果將為臨床手術(shù)麻醉品的合理應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù),為臨床海洛因成癮戒斷治療、法醫(yī)學(xué)鑒定提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R749.64
【目錄】：

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1 柴爾青;海洛因成癮的檢測方法及其神經(jīng)病理學(xué)特征研究[D];蘭州大學(xué);2015年

2 邱平明;海洛因成癮戒斷大鼠相關(guān)腦區(qū)差異蛋白的分離與鑒定[D];南方醫(yī)科大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王愛花;海洛因成癮戒斷者情緒障礙中喚醒度異常的功能磁共振研究[D];汕頭大學(xué);2009年

2 吳曉雄;登仁橋社區(qū)居民對海洛因成癮相關(guān)知識(shí)、態(tài)度的調(diào)查[D];中南大學(xué);2012年

3 羅孝美;硫化氫和一氧化氮對海洛因成癮大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2009年

4 周燕;海洛因成癮大鼠中腦腹側(cè)被蓋區(qū)和伏隔核損害的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2005年

5 韋獻(xiàn)良;海洛因成癮大鼠腦組織超微結(jié)構(gòu)和GFAP表達(dá)的變化[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2004年

6 林彬;基于fMRI和ERP技術(shù)探索沖動(dòng)性決策障礙在海洛因成癮機(jī)制中的作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

7 邱思友;基于功能磁共振成像的肥胖和海洛因成癮神經(jīng)生理機(jī)制研究[D];西安電子科技大學(xué);2014年

8 周曉黎;內(nèi)側(cè)隔核膽堿能神經(jīng)在海洛因成癮和復(fù)吸中的作用[D];寧波大學(xué);2012年

9 侯信合;外源性H_2S對海洛因成癮大鼠學(xué)習(xí)記憶和腦形態(tài)學(xué)改變的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

10 劉劍;海洛因成癮大鼠立體定向外科治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：海洛因成癮的檢測方法及其神經(jīng)病理學(xué)特征研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：187988