本文關(guān)鍵詞：光熱型超聲造影劑的制備及其用于腫瘤診療的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《昆明醫(yī)科大學(xué)》 2015年

乳腺癌回流淋巴結(jié)靶向微泡的制備研究

楊陽  

【摘要】：目的：①優(yōu)化制備抗體高粘附率淋巴管靶向脂質(zhì)微泡,即載VEGFR-3抗體和Podoplanin抗體的靶向微泡并做相關(guān)理化性質(zhì)評價。②在體外試驗中觀察其尋靶效果。③探討體外試驗中,推動超聲造影劑位移的有效超聲輻射力參數(shù)。方法：①利用生物素-親和素橋接法制備載VEGFR-3抗體和Podoplanin抗體的靶向脂質(zhì)微泡,優(yōu)化制備工藝、改進制作流程、調(diào)整脂質(zhì)、生物素及親和素配比,利用免疫熒光進行相關(guān)評價②采用分組對照試驗,以直接、間接法觀察尋靶效果,直接法：普通微泡與靶向微泡分別加入到淋巴管細胞培養(yǎng)皿中,孵育10min,洗滌3遍,將兩組置于顯微鏡下進行觀察,使用圖像分析軟件IPP進行離線分析及采用SPSS軟件包對與細胞結(jié)合的微泡數(shù)量進行統(tǒng)計學(xué)分析；間接法：利用微泡和細胞重量的差異,采用分組孵育、離心法直觀觀察靶向結(jié)合效果③分別在流體靜止及模擬淋巴液流動條件下,以及管腔處于深部時,尋找推動微泡位移到對側(cè)管壁的最佳輻射力參數(shù),利用高速攝像機評價其對微泡的推移效果。結(jié)果：①成功制備了高粘附率靶向微泡：平均粒徑為0.99μm,流式細胞儀證實平均抗體結(jié)合率達81.3%②圖像軟件IPP離線分析顯示靶向組微泡與淋巴管內(nèi)皮細胞結(jié)合數(shù)量明顯優(yōu)于普通組；高倍顯微鏡下(×100倍)靶向組平均每個視野有(151±20)個靶向微泡粘附,普通組平均每個視野有(12±4)個普通微泡粘附(t=19.19,P0.01,結(jié)果有顯著統(tǒng)計學(xué)差異)；與普通微泡相比,靶向微泡與細胞大量結(jié)合,且在400g離心力下仍能保持牢固的鏈接③靜止條件下,峰值負壓530kPa,占空比0.031,脈沖重復(fù)頻率0.97kHz,聲強0.29w/cm2,機械指數(shù)0.35,恰好能使微泡貼于對側(cè)管壁；以淋巴液流速流動時,有1/2左右的微泡從管腔中央流走,而沒貼于管壁,若加大輻照參數(shù),雖貼壁微泡增多,但75%被高聲壓擊破；輻射力先作用于淺部管腔,淺部管腔中的微泡被完全阻斷或分離開后深部管腔內(nèi)微泡才能受到聲輻射力作用。結(jié)論：①在生物素-親和素橋接法的基礎(chǔ)上,對靶向微泡的制備工藝、流程、試劑配比等方面進行相關(guān)優(yōu)化,成功制備了粒徑小而均一的VEGFR-3抗體及Podoplanin抗體高粘附率淋巴管靶向微泡,并在體外尋靶試驗中得到驗證；②此抗體高粘附率靶向造影劑的成功制備及較好的體外尋靶效果,為在體腫瘤新生淋巴管靶向顯影提供了重要實驗基礎(chǔ),有望使造影劑大量聚集、長時間停留在腫瘤新生淋巴管靶區(qū),增強對比顯像效果,相比快速消退的非靶區(qū)更容易被識別。也就是說,這種抗體高粘附率靶向微泡有望作為一種特異性識別淋巴系統(tǒng)腫瘤細胞的分子探針,在超聲追蹤下,準(zhǔn)確顯示腫瘤新生淋巴管,并對腫瘤良惡性質(zhì)做出快速鑒別；③輻射力可推移管腔中的微泡更多的貼壁,但在不同流動狀態(tài)下及位置條件下所需輻射力參數(shù)和效果不同。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R445.1;R737.9
【目錄】：

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