發(fā)布時(shí)間：2020-12-06 11:58

　　姬松茸食藥用價(jià)值豐富、栽培效益可觀、有利于資源循環(huán)利用,發(fā)展前景廣闊。但國(guó)內(nèi)種質(zhì)資源缺乏,因此進(jìn)行姬松茸育種研究十分必要。隨著社會(huì)發(fā)展素食者不斷增多,而素食者普遍缺乏維生素B₁₂。據(jù)此,本研究以姬松茸JS01為試驗(yàn)材料,分別獲取其原生質(zhì)體和孢子,并通過(guò)紫外誘變?cè)囼?yàn)、誘變菌株的篩選和鑒定試驗(yàn)、栽培試驗(yàn)等,以期獲得高產(chǎn)維生素B₁₂的姬松茸菌株,研究結(jié)果如下:1.通過(guò)單因素試驗(yàn)以及正交實(shí)驗(yàn),利用SPSS 22.0軟件進(jìn)行分析,對(duì)姬松茸原生質(zhì)體的制備及再生條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明原生質(zhì)體最佳制備條件為:菌齡7 d,以0.6mol·L^-1 KCl作滲透壓穩(wěn)定劑,溶壁酶濃度1.5%,酶解溫度30℃,酶解時(shí)間4.0 h,pH6.0,在此條件下原生質(zhì)體產(chǎn)量高達(dá)1.97×10⁷個(gè)·mL^-1;菌齡6 d,以0.6 mol·L^-1 MgSO₄作滲透壓穩(wěn)定劑,溶壁酶濃度2.0%,酶解溫度30℃,酶解時(shí)間3.0 h,pH 6.5,再生培養(yǎng)基為GM時(shí),原生質(zhì)體的再... 

【文章來(lái)源】：陜西理工大學(xué)陜西省

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

拮抗試驗(yàn)結(jié)果

陜西理工大學(xué)碩士學(xué)位論文32圖3-3拮抗試驗(yàn)結(jié)果Fig.3-3Antagonismtestresults3.3.3高效液相檢測(cè)結(jié)果3.3.3.1色譜條件選擇據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，維生素B12在361nm處紫外吸收強(qiáng)度最大，且吸收峰干擾因素少[102]，因此試驗(yàn)中紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)置為361nm。酸性條件下維生素B12比較穩(wěn)定，且磷酸鹽對(duì)色譜柱有一定改性作用，因此用磷酸調(diào)節(jié)水相pH，并加入NaH2PO4緩沖，結(jié)果峰形對(duì)稱(chēng)且分離度高。3.3.3.2線性關(guān)系圖3-5為測(cè)定維生素B12的標(biāo)準(zhǔn)曲線，其線性回歸方程為Y=13.387X+0.7609（R2=0.9994），維生素B12在0.1μg·mL-1~10.0μg·mL-1范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好。圖3-4維生素B12標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖Fig.3-4LiquidchromatogramofvitaminB12standard時(shí)間（min）峰面積（mAU）時(shí)間（min）峰面積（mAU）6.200時(shí)間/min峰面積/mAU6.200

第3章姬松茸高產(chǎn)維生素B12菌株的誘變及選育35（a）（b）圖3-6菌絲體維生素B12含量液相色譜圖Fig.3-6LiquidchromatogramofvitaminB12contentinmycelium表3-7菌絲生長(zhǎng)速度比較Tab.3-7Comparisonofthegrowthrateofmycelium菌株菌絲生長(zhǎng)速度Mycelialgrowthrate/（cm·d-1）Strains第1代第5代第10代JS010.2450.2250.200BUV-50.2100.2050.185BUV-160.2300.2150.1903.3.4分子鑒定結(jié)果3.3.4.1PCR凝膠電泳結(jié)果圖3-7為擴(kuò)增ITS序列結(jié)果，從結(jié)果可以看出，本次實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出單一且明亮的條帶，同時(shí)該條帶位置位于750bp左右，與預(yù)期結(jié)果一致，因此可以用于后續(xù)測(cè)序?qū)嶒?yàn)。峰面積/mAU時(shí)間/min6.422峰面積/mAU時(shí)間/min（min）6.485

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]三種食用菌子實(shí)體的營(yíng)養(yǎng)成分及抗氧化性分析[D]. 景彥萍.山西大學(xué) 2019
[3]金針菇與巨大口蘑原生質(zhì)體融合育種研究[D]. 鄭錦榮.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]玉蕈與金針菇原生質(zhì)體融合研究[D]. 王國(guó)正.天津師范大學(xué) 2016
[5]印度塊菌與赤芝原生質(zhì)體融合研究[D]. 馬欣燕.天津師范大學(xué) 2016
[6]九種常用維生素治療性、診斷性監(jiān)測(cè)和臨床應(yīng)用研究[D]. 王乃東.山東大學(xué) 2015
[7]姬松茸液體發(fā)酵及其保肝膠囊的制備[D]. 王航.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[8]單孢雜交選育草菇耐低溫高產(chǎn)新菌株[D]. 林鋒.上海海洋大學(xué) 2015
[9]營(yíng)養(yǎng)素補(bǔ)充劑類(lèi)保健食品中維生素類(lèi)成分檢測(cè)方法研究[D]. 邢亞?wèn)|.安徽中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[10]巴氏蘑菇多糖降血糖機(jī)制的研究[D]. 歐陽(yáng)玉倩.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：2901324