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利用過量表達ZmANT基因創(chuàng)制大粒玉米新材料

發(fā)布時間:2020-12-18 21:49
  玉米(Zea mays L.)是我國重要的糧食、飼料和能源作物,其產(chǎn)量的高低直接關系到我國的糧食安全及農(nóng)業(yè)發(fā)展。由于我國玉米產(chǎn)量受到種植密度和面積的條件限制,從而籽粒大小和粒重成為影響玉米產(chǎn)量的主要因素。本研究在調(diào)控玉米籽粒性狀關鍵基因的挖掘以及功能分析方面開展了一系列的工作,最終通過過量表達調(diào)控籽粒發(fā)育的關鍵基因ZmANT獲得了大粒玉米的新材料。具體研究結果如下:玉米ZmANT基因的同源克隆。AINTEGUMENTA(ANT)基因是擬南芥(Arabidopsis)中一個調(diào)節(jié)種子以及器官大小的關鍵基因。經(jīng)過同源序列比對,從玉米中克隆到一個擬南芥ANT的同源基因ZmANT。過量表達ZmANT能夠恢復擬南芥ant突變體種子變小的表型。本研究構建了用于轉化擬南芥的ZmANT過表達載體,并將該目的基因分別轉入到擬南芥野生型(Col)和ant突變體的株系中。結果表明,該基因的過表達能夠顯著提高擬南芥野生型種子的大小及千粒重,并且還可以恢復擬南芥ANT基因突變所導致的千粒重減輕和種子變小的表型。所以,ZmANT基因在調(diào)控種子大小方面具有和擬南芥ANT同樣的功能。ZmANT在玉米中的表達模式分析。為... 

【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學山東省

【文章頁數(shù)】:76 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

利用過量表達ZmANT基因創(chuàng)制大粒玉米新材料


ZmANT基因的序列比對及進化樹分析

序列,擬南芥,載體,突變體


為了探究ZmANT基因在調(diào)控種子大小方面的功能,我們通過酶切含有目的基因的克隆質粒,并以p Cambia1300作為植物表達載體與目的基因相連接,成功構建了35S::ZmANT過表達載體(圖3-2)。然后利用農(nóng)桿菌侵染擬南芥花序的方法,將含有目的基因ZmANT的表達載體轉入到擬南芥的野生型中,并通過抗性篩選以及基因組DNA的PCR鑒定,確定ZmANT基因已成功整合到擬南芥基因組中。我們從ABRC購買了ant突變體(salk_022770),該突變體含有插在3’-UTR上的T-DNA序列,相比野生型來說,ant突變體中ANT基因的轉錄表達水平下降,是弱突變體(圖3-3)。并且該突變體育性正常,其種子具有顯著變小的表型(圖3-4 B)。所以,我們也將35S::ZmANT過表達載體轉入ant突變體中,觀察其種子的表型恢復情況。圖3-3擬南芥野生型和ant突變體中ANT基因的表達水平

擬南芥,突變體,野生型,表型


擬南芥野生型和ant突變體中ANT基因的表達水平

【參考文獻】:
期刊論文
[1]玉米產(chǎn)量性狀與產(chǎn)量的相關性及通徑分析[J]. 王楠,王樹星,張樂,任紅麗,黨潤海,安綠宇.  黑龍江農(nóng)業(yè)科學. 2019(01)
[2]制約玉米單產(chǎn)的因素及主要解決措施[J]. 黃大海.  吉林農(nóng)業(yè). 2015(18)
[3]基于水稻粒長OsPPKL1基因的玉米同源基因的生物信息學分析[J]. 田玉煥,張亞玲,范子洋,陶勇生.  貴州農(nóng)業(yè)科學. 2014(12)
[4]玉米籽粒成熟標志一乳線的研究[J]. 王忠孝,杜成貴,王慶成.  山東農(nóng)業(yè)科學. 1986(04)
[5]玉米主要農(nóng)藝性狀的通徑分析[J]. 徐占宏,樸淙鶴,郭鳳蘭.  作物雜志. 1986(01)



本文編號:2924663

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