發(fā)布時間：2018-03-09 17:57

  本文選題：卵形巴貝斯蟲　切入點：熒光定量PCR　出處：《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立一種檢測感染牛的卵形巴貝斯蟲的敏感、快速方法,本研究根據(jù)GenBank中登錄的卵形巴貝斯蟲18S rRNA保守區(qū)設(shè)計1對特異引物,通過優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了檢測卵形巴貝斯蟲熒光定量PCR方法。結(jié)果顯示,該方法可以特異地檢測出卵形巴貝斯蟲DNA,對瑟氏泰勒蟲、牛巴貝斯蟲和雙芽巴貝斯蟲DNA的檢測均為陰性;該方法的靈敏度可達(dá)1.26 copies/μL,比普通PCR靈敏度高100倍。組內(nèi)及組間重復(fù)試驗的變異系數(shù)均小于3%。對60份臨床牛血液DNA樣本進(jìn)行檢測,熒光定量PCR和常規(guī)PCR的陽性檢出率分別為41.67%和33.33%。結(jié)果表明,本試驗建立的熒光定量PCR方法可用于對卵形巴貝斯蟲定量分析和卵形巴貝斯蟲病的分子流行病學(xué)調(diào)查。
[Abstract]:In order to establish a sensitive and rapid method for the detection of Babes ovale in infected cattle, a pair of specific primers were designed according to the 18s rRNA conservative region of Babes ovum registered in GenBank, and the reaction conditions were optimized. A fluorescent quantitative PCR method was established for the detection of Babes ovale. The results showed that the method could specifically detect the DNA of Babes ovum, but the detection of DNA of Taylor serovar, Babes and Babes was negative. The sensitivity of this method can reach 1.26 copies/ 渭 L, which is 100 times higher than that of ordinary PCR. The coefficient of variation of repeated tests within and between groups is less than 3. 60 clinical bovine blood DNA samples were detected. The positive rates of fluorescent quantitative PCR and routine PCR were 41.67% and 33.33, respectively. The results showed that the fluorescent quantitative PCR method established in this study could be used for quantitative analysis of Babes ovale and molecular epidemiological investigation of oval Babes's disease.
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動物科技學(xué)院;預(yù)防獸醫(yī)學(xué)吉林省重點實驗室;延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【基金】：吉林省科技發(fā)展計劃項目(20150623004TC) 吉林省重點學(xué)科培育項目(吉農(nóng)院合字[2015]第x030號) 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院種子基金項目(吉農(nóng)院合字[2014]第Z07號)
【分類號】：S858.23

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本文編號：1589628