慢病毒介導(dǎo)shRNA沉默hnRNPA2/B1基因?qū)m頸癌細胞化療敏感性的影響及作用機制初探
發(fā)布時間：2024-07-06 05:50
目的:分析不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoproteinA2/B1,hnRNPA2/B1)基因?qū)m頸癌細胞的平板克隆形成、轉(zhuǎn)移、侵襲能力和增殖能力、細胞周期的影響;以及探討其改變宮頸癌細胞化療藥物敏感性及作用機制。方法:設(shè)計含有hnRNPA2/B1 shRNA(short hairpin RNA,shRNA)干擾序列4對、陰性對照1對。構(gòu)建含靶向hnRNPA2/B1 shRNA的重組慢病毒質(zhì)粒,并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Caski細胞、Hela細胞,qRT-PCR檢測hnRNPA2/B1 mRNA表達水平,Western blot檢測hnRNPA2/B1蛋白表達水平;分別用平板克隆形成實驗、劃痕實驗、細胞侵襲實驗檢測細胞的生物功能;MTT比色法檢測細胞的增殖能力、洛鉑(Lobaplatin)作用于細胞的IC50、伊立替康(Irinotecan Hydrochloride)作用于細胞的IC50;流式細胞術(shù)分析hnRNPA2/B1基因沉默后細胞周期以及洛鉑、伊立替康對細胞凋亡作用的改變;用qRT-PCR和Western blot檢測相關(guān)基因bax...
【文章頁數(shù)】：70 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
本文編號：4002155
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圖1.pGMLV-SC1RNAi慢病毒載體圖譜
貴州醫(yī)科大學(xué)2016屆科學(xué)學(xué)位碩士研究生學(xué)位論文CaSki細胞,中文名稱人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細胞，形態(tài)上皮細胞，購自中院細胞庫。含有完整的HPV-16(每個細胞大約600個拷貝)和HPV-18相HeLa細胞，中文名稱人宮頸癌細胞，形態(tài)上皮細胞，購自中國科學(xué)庫。含有人乳....
圖2慢病毒干擾載體的序列對比圖譜
NC-ShNRA序列對比圖2慢病毒干擾載體的序列對比圖譜Fig.2mapofSequencelentiviralinterferedvectorShNRA-1序列對比ShNRA-2序列對比
圖3慢病毒干擾載體的序列對比圖譜
NC-ShNRA序列對比圖2慢病毒干擾載體的序列對比圖譜Fig.2mapofSequencelentiviralinterferedvectorShNRA-1序列對比ShNRA-2序列對比
圖4慢病毒shRNA感染細胞熒光照片
圖4慢病毒shRNA感染細胞熒光照片AhnRNPA2/B1-shRNA1一號孔，BhnRNPA2/B1-shRNA1六號孔，ChnRNPA2/B1-shR一號孔.DhnRNPA2/B1-shRNA2六號孔，EhnRNPA2/B1-shRNA3一號孔，F(xiàn)hnR....
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