發(fā)布時(shí)間：2020-11-01 00:25

　　 高脂飲食會(huì)引起肥胖,同時(shí)伴隨著炎癥和氧化應(yīng)激,蛋氨酸限制(MR)能夠在不限制能量攝入的情況下減輕體重,而且還能降低機(jī)體炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激,但是具體的作用機(jī)制還不清楚。高脂飲食會(huì)改變腸道菌群的結(jié)構(gòu),腸道菌群參與了肥胖的發(fā)生,與機(jī)體炎癥和氧化應(yīng)激密切相關(guān)。蛋氨酸限制是否是通過(guò)改善腸道微生物的結(jié)構(gòu)來(lái)降低體重、炎癥和氧化應(yīng)激還是未知的。因此,本研究通過(guò)探究MR對(duì)高脂飲食小鼠腸道菌群、體重、炎癥和氧化應(yīng)激的影響,并以糞菌移植的方式驗(yàn)證MR是否是通過(guò)改善腸道微生物的結(jié)構(gòu)來(lái)降低高脂飲食小鼠體重、炎癥和氧化應(yīng)激。將雄性C57BL/6小鼠(4周齡,18~20 g)隨機(jī)分為3組:(1)低脂正常飲食組(C組,4%脂肪,0.86%蛋氨酸);(2)高脂正常蛋氨酸飲食組(HM組,20%脂肪,0.86%蛋氨酸);(3)高脂MR飲食組(LM組,20%脂肪,0.17%蛋氨酸)。12周后隨機(jī)處死一部分并取血液、腸和腸內(nèi)容物,測(cè)定血脂相關(guān)指標(biāo)、血液和腸道組織氧化還原狀態(tài)相關(guān)指標(biāo),分析盲腸菌群和結(jié)腸菌群,觀察腸組織切片。繼續(xù)飼養(yǎng)剩余小鼠到第30周,然后將HM組和LM組小鼠分別隨機(jī)分為2組,進(jìn)行為期7天的抗生素處理后糞菌移植,分組情況如下:(1)高脂飲食+移植C組糞菌組(HF-C);(2)高脂飲食+移植LM組糞菌組(HF-MR);(3)蛋氨酸限制飲食+移植C組糞菌組(MR-C);(4)蛋氨酸限制飲食+移植HM組糞菌組(MR-HF)。隔天灌胃糞菌一次,持續(xù)14天,灌胃結(jié)束后,喂養(yǎng)18天結(jié)束實(shí)驗(yàn),處死并取血液、腸和腸內(nèi)容物,測(cè)定血脂相關(guān)指標(biāo)、血液和腸組織炎癥相關(guān)指標(biāo)和氧化還原狀態(tài)相關(guān)指標(biāo),觀察腸組織切片,分析結(jié)腸菌群。高脂飲食飼喂小鼠后,與HM組相比,LM組小鼠體重顯著降低5.77 g,血漿甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量極顯著降低,高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的含量極顯著升高;盲腸菌群和結(jié)腸菌群的多樣性和均勻度增加,結(jié)腸雙歧桿菌和顫螺桿菌豐度分別顯著升高,Akkermansia豐度顯著降低;血漿脂多糖(LPS)和脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)含量顯著降低,回腸促炎性因子基因表達(dá)顯著下調(diào);血漿總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)和還原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)水平顯著升高,丙二醛(MDA)含量顯著降低;回腸T-AOC和GSH/GSSG水平顯著升高;結(jié)腸GSH/GSSG水平顯著升高,MDA含量顯著降低。糞菌移植后,HF-MR組小鼠體重比HF-C組低3.53 g,MR-HF組小鼠體重比MR-C組低4.16 g。與HF-C組相比,HF-MR組小鼠血漿TG和TC含量極顯著降低;血漿LPS含量顯著降低,血漿腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-8(IL-8)含量極顯著降低;血漿T-AOC、GSH-Px和過(guò)氧化氫酶(CAT)含量顯著升高,MDA含量顯著降低;結(jié)腸雙歧桿菌屬豐度顯著增加。與MR-C組相比,MR-HF組小鼠血漿TNF-α和IL-8含量顯著升高;回腸T-AOC和CAT含量顯著降低,結(jié)腸T-AOC含量顯著降低。高脂飲食導(dǎo)致小鼠腸道菌群多樣性降低,破壞腸道菌群結(jié)構(gòu)(如益生菌雙歧桿菌豐度降低),導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生肥胖,同時(shí)伴隨著炎癥反應(yīng)和氧化還原狀態(tài)失衡;MR通過(guò)增加腸道菌群多樣性,改善腸道菌群結(jié)構(gòu)(增加雙歧桿菌豐度),控制高脂飲食小鼠體重增加,同時(shí)能夠減輕炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)。
【學(xué)位單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R151.41
【部分圖文】：

圖 3-3 T-RFLP 分析盲腸菌群Fig 3-3 the analysis of cecum microbiota by T-RFLP：圖(a)為盲腸菌群基于 T-RFLP 結(jié)果的 PCA 分析；圖(b)為盲腸菌群的多樣性指數(shù)；圖(c)為盲腸菌基于 T-RFLP 結(jié)果的聚類分析。1.5 蛋氨酸限制對(duì)高脂飲食小鼠結(jié)腸菌群影響

圖 3-4 結(jié)腸菌群 observed species 指數(shù)Fig 3-4 the observed species index of colon microbiota

結(jié)腸菌群chao指數(shù)
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本文編號(hào)：2864739