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青蒿琥酯對高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷的干預(yù)作用及其機制研究

發(fā)布時間:2016-11-16 18:29

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《桂林醫(yī)學(xué)院》 2015年

青蒿琥酯對高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷的干預(yù)作用及其機制研究

蔣姍姍  

【摘要】:目的:探討青蒿琥酯(Art)是否可以抑制高糖誘導(dǎo)的大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK-52E)凋亡及其相關(guān)機制。方法:傳代培養(yǎng)NRK-52E細(xì)胞,分為6組:正常對照組、高糖組、Art小劑量組、Art中劑量組、Art高劑量組、依那普利組。培養(yǎng)48 h后,四甲基偶氮唑鹽微量比色(MTT)法觀察細(xì)胞增殖能力的改變;流式細(xì)胞儀AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡指數(shù);酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)蛋白含量;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測細(xì)胞Toll樣受體4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)mRNA含量;蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)法檢測細(xì)胞TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:①與正常對照組相比,高糖組NRK-52E細(xì)胞增殖抑制,細(xì)胞凋亡率增高,細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-8和MCP-1蛋白濃度升高,細(xì)胞中TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯升高(P0.05)。②與高糖組比較,Art小、中、高劑量組NRK-52E細(xì)胞增殖明顯,細(xì)胞凋亡率減低,細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-8和MCP-1蛋白濃度降低,細(xì)胞中TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯降低,且干預(yù)作用呈劑量依賴性(P0.05)。結(jié)論:Art可抑制高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡,其機制可能與Art抑制TLR4/NF-κB信號通路,下調(diào)TLR4、NF-κB的表達(dá)水平,減少相關(guān)炎癥因子TNF-α、IL-8、MCP-1的生成有關(guān)。青蒿琥酯的抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用可能有助于糖尿病腎病的治療。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R285.5
【目錄】:

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【參考文獻(xiàn)】

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